Cellules HEK293T

HEK 293T, un dérivé hautement transfectable de la cellule parentale HEK 293, se distingue comme un outil polyvalent et puissant dans le domaine de la biotechnologie pour la production de protéines recombinantes et de divers types de vaccins.

Les cellules HEK-293T ont été générées en transfectant des cellules 293 de rein embryonnaire avec un plasmide codant pour l'antigène T large du SV40. La lignée cellulaire HEK293 originale a été développée à partir des cellules épithéliales du tissu rénal embryonnaire humain, et sa transformation s'est produite lors de ce qui était notamment la 293e expérience menée par les chercheurs.

Dans le domaine du développement de vaccins, les cellules rénales embryonnaires 293T sont essentielles pour la production de vecteurs viraux, y compris les vecteurs adénoviraux. Les cellules HEK293T, dans des conditions de culture spécifiques, sont transfectées avec des vecteurs portant des éléments adénoviraux et rétroviraux, y compris l'origine de réplication SV40, ce qui conduit à la production de particules semblables à des virus (VLP).

Les VLP, dépourvues de matériel génétique viral, sont essentielles pour constituer la base des vaccins à base de sous-unités et de VLP. La production de protéines recombinantes dans les cellules 293T est facilitée par diverses méthodes de transfection, l'accent étant mis sur la production de protéines de fusion AP et d'autres types de protéines qui constituent la composante antigénique des vaccins.

Les capacités d'ingénierie du génome de la lignée cellulaire 293T permettent de personnaliser les constructions d'expression, ce qui stimule encore la production de vecteurs viraux. Associée à la capacité de produire des protéines dans des conditions de culture en suspension ou d'adhérence, la lignée cellulaire 293T constitue une solution complète pour le développement de vaccins modernes.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie