HEK293T šūnas

HEK 293T, kas ir vecākās HEK 293 šūnas atvasinājums ar augstu transfekcijas spēju, izceļas kā daudzpusīgs un spēcīgs instruments biotehnoloģiju jomā, lai ražotu rekombinantus proteīnus un dažādu veidu vakcīnas.

HEK 293T šūnas tika radītas, transfektējot embrionālās nieru 293 šūnas ar plazmīdu, kas kodē SV40 lielo T antigēnu. Sākotnējā HEK293 šūnu līnija tika izveidota no cilvēka embrionālo nieru audu epitēlija šūnām, un tās transformācija notika, kas bija 293. pētnieku veiktais eksperiments.

Vakcīnu izstrādes jomā 293T embrionālo nieru šūnas ir ļoti svarīgas vīrusu vektoru, tostarp adenovīrusu vektoru, ražošanā. HEK293T šūnas īpašos kultivēšanas apstākļos tiek transficētas ar vektoriem, kas satur adenovīrusu un retrovīrusu elementus, tostarp SV40 replikācijas avotu, kā rezultātā rodas vīrusiem līdzīgas daļiņas (VLP).

VLP, kas nesatur vīrusa ģenētisko materiālu, ir ļoti svarīgas, veidojot uz apakšvienībām un VLP balstītu vakcīnu pamatu. Rekombinantu olbaltumvielu ražošanu 293T šūnās atvieglo dažādas transfekcijas metodes, īpašu uzmanību pievēršot AP fusion olbaltumvielu un citu olbaltumvielu veidu, kas veido vakcīnu antigēno komponentu, veidošanai.

293T šūnu līnijas genoma inženierijas iespējas ļauj pielāgot ekspresijas konstrukcijas, vēl vairāk veicinot vīrusu vektoru ražošanu. Tas kopā ar spēju ražot proteīnus suspensijas kultūrā vai adherentos apstākļos padara 293T šūnu līniju par kompleksu risinājumu modernu vakcīnu izstrādei.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu