Pāriet uz saturu
HEK293FT
Audums
Augļa nieres
Sinonīmi
HEK293-FT, HEK-293FT, HEK 293FT, HEK-293-FT, HEK293FT, 293-FT, FT-293

Dokumenti

HEK293FT

Cell line · Preces numurs 305275

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HEK293FT šūnu līnija ir HEK293 šūnu līnijas atvasinājums, kas sākotnēji iegūta no cilvēka embrionālajām nieru šūnām. Apzīmējums "FT" norāda, ka šīs šūnas ir transficētas ar SV40 lielā T-antigēna gēnu, kas uzlabo to spēju replicēt plazmīdu vektorus, kuri satur SV40 replikācijas sākumu. Šī modifikācija padara 293FT šūnas īpaši noderīgas augstas efektivitātes vīrusu vektoru, piemēram, lentivīrusu un adenovīrusu, ražošanai un transfekcijas pētījumiem molekulārās bioloģijas un gēnu terapijas jomā.

HEK293FT šūnām piemīt epitēlija morfoloģija, un tās ātri aug kultūrā, nodrošinot stabilu un uzticamu sistēmu augstas titrēšanas pakāpes vīrusu krājumu ražošanai. Tās saglabā daudzas vecāku HEK293 šūnu īpašības, tostarp augstu transfekcijas efektivitāti un spēju atbalstīt rekombinantu vīrusu replikāciju. Pētnieki izmanto 293FT šūnas, lai ražotu vīrusu vektorus gēnu piegādei, pētītu gēnu funkciju un regulāciju un izstrādātu gēnu terapiju dažādām slimībām. 293FT šūnu loma vīrusu vektoru ražošanā padara 293FT šūnas par stūrakmeni gēnu terapijas, funkcionālās genomikas un molekulārās klonēšanas jomās, veicinot pētniecības un terapijas izstrādes progresu.

Audums
Augļa nieres
Sinonīmi
  • HEK293-FT
  • HEK-293FT
  • HEK 293FT
  • HEK-293-FT
  • HEK293FT
  • 293-FT
  • FT-293

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This HEK293-derived cell line (293-FT) contains an SV40 expression plasmid with neomycin selection, supporting enhanced proliferation and transfection efficiency. The construct provides stable SV40. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
HEK293FT (Cytion kataloga numurs 305275)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_6911

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
SV40 lielais T antigēns, adenovīrusa agrīnā 1A apgabala (E1A)
Vīrusi
Transformants: Adenovīruss 5, Sīmiāna vīruss 40 (SV40)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% FBS.
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
2 līdz 5 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Auglis

10Informācija par produktu

Sastāva tabula