Ga naar de inhoud
HEK293FT
Weefsel
Foetale nier
Synoniemen
HEK293-FT, HEK-293FT, HEK 293FT, HEK-293-FT, HEK293FT, 293-FT, FT-293

Documenten

HEK293FT

Cell line · Productnummer 305275

€800.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HEK293FT-cellijn is een afgeleide van de HEK293-cellijn, die oorspronkelijk afkomstig is van menselijke embryonale niercellen. De aanduiding "FT" geeft aan dat deze cellen zijn getransfecteerd met het SV40-groot T-antigeengen, waardoor ze beter in staat zijn om plasmidevectoren met de SV40-replicatieoorsprong te repliceren. Deze modificatie maakt 293FT cellen bijzonder nuttig voor de productie van virale vectoren met een hoge efficiëntie, zoals lentivirussen en adenovirussen, en voor transfectiestudies in moleculair biologisch en gentherapieonderzoek.

HEK293FT cellen vertonen een epitheliale morfologie en groeien snel in cultuur, waardoor ze een robuust en betrouwbaar systeem vormen voor de productie van virale voorraden met een hoge triter. Ze behouden veel van de eigenschappen van de ouderlijke HEK293 cellen, waaronder een hoge transfectie-efficiëntie en het vermogen om de replicatie van recombinante virussen te ondersteunen. Onderzoekers gebruiken 293FT cellen voor de productie van virale vectoren voor genoverdracht, om genfunctie en -regulatie te bestuderen en om gentherapieën voor verschillende ziekten te ontwikkelen. Hun rol in de productie van virale vectoren maakt 293FT cellen tot een hoeksteen op het gebied van gentherapie, functionele genomica en moleculair klonen, wat de voortgang van onderzoek en therapeutische ontwikkeling vergemakkelijkt.

Weefsel
Foetale nier
Synoniemen
  • HEK293-FT
  • HEK-293FT
  • HEK 293FT
  • HEK-293-FT
  • HEK293FT
  • 293-FT
  • FT-293

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This HEK293-derived cell line (293-FT) contains an SV40 expression plasmid with neomycin selection, supporting enhanced proliferation and transfection efficiency. The construct provides stable SV40. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HEK293FT (Cytion catalogusnummer 305275)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6911

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
SV40 groot T-antigeen, Adenovirus vroege regio 1A (E1A)
Virussen
Transformant: Adenovirus 5, Simian virus 40 (SV40)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS.
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
2 tot 5 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Foetus

10Productgegevens

Overzichtstabel