Tartalomra ugrás
HEK293FT
Szövet
Magzati vese
Szinonimák
HEK293-FT, HEK-293FT, HEK 293FT, HEK-293-FT, HEK293FT, 293-FT, FT-293

Dokumentumok

HEK293FT

Cell line · Termékszám 305275

€800.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HEK293FT sejtvonal az eredetileg emberi embrionális vesesejtekből származó HEK293 sejtvonal származéka. Az "FT" megjelölés azt jelzi, hogy ezeket a sejteket SV40 nagy T-antigén génnel transzfektálták, ami fokozza az SV40 replikációs eredetet tartalmazó plazmidvektorok replikációjára való képességüket. Ez a módosítás a 293FT sejteket különösen hasznossá teszi a vírusvektorok, például lentivírusok és adenovírusok nagy hatékonyságú előállítására, valamint a molekuláris biológiai és génterápiás kutatások során végzett transzfekciós vizsgálatokra.

A HEK293FT sejtek epiteliális morfológiát mutatnak és gyorsan nőnek a tenyészetben, így robusztus és megbízható rendszert biztosítanak a magas titerű vírusállományok előállításához. Megtartják a szülői HEK293 sejtek számos jellemzőjét, beleértve a magas transzfekciós hatékonyságot és a rekombináns vírusok szaporodásának támogatását. A kutatók a 293FT sejteket génszállításra szolgáló vírusvektorok előállítására, a génfunkció és -szabályozás tanulmányozására, valamint különböző betegségek génterápiáinak kifejlesztésére használják. A vírusvektorok előállításában betöltött szerepük miatt a 293FT sejtek a génterápia, a funkcionális genomika és a molekuláris klónozás sarokkövei, elősegítve a kutatás és a terápiás fejlesztés előrehaladását.

Szövet
Magzati vese
Szinonimák
  • HEK293-FT
  • HEK-293FT
  • HEK 293FT
  • HEK-293-FT
  • HEK293FT
  • 293-FT
  • FT-293

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This HEK293-derived cell line (293-FT) contains an SV40 expression plasmid with neomycin selection, supporting enhanced proliferation and transfection efficiency. The construct provides stable SV40. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis

04Azonosítók

Hivatkozás
HEK293FT (Cytion katalógusszám: 305275)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_6911

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
SV40 nagy T antigén, Adenovírus korai 1A régió (E1A)
Vírusok
Transzformáns: Adenovírus 5, Simian virus 40 (SV40)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel.
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
2–5 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Magzat

10Termékadatok

Összetételi táblázat