HEK293 sejtek

A HEK293 sejtvonal, egy immortalizált epitélsejtvonal, amelyet az 1970-es években Alex van der Eb az Utrechti Egyetemen emberi embrionális vesesejtekből nyert, figyelemre méltó sokoldalúsága és könnyű genetikai manipulálhatósága miatt a molekuláris biológia és a biotechnológiai alkalmazások kulcsfontosságú kísérleti modelljévé vált.

A HEK293 sejtvonal transzformációja az Adenovírus 5 DNS egy specifikus szegmensének integrálásával történt, amely az adenovírus E1A és E1B génjeit ágyazta be a sejt genomjába. Az adenovírus DNS-módosítás lehetővé tette, hogy a sejtvonalak hatékonyan képesek legyenek idegen DNS-t felvenni, ami nagy transzfekciós hatékonyságnak nevezett tulajdonság. A vírus-DNS beépítése a HEK293 sejtek genomjába a sejtek immortalizációját eredményezte, és jelentősen növelte e sejtek hasznosságát biotechnológiai alkalmazásokban azáltal, hogy megkönnyítette az exogén DNS stabil beépülését és kifejeződését, amit stabil transzfekciónak nevezünk. Ez a képesség lehetővé teszi az idegen gének tartós jelenlétét és működését a sejtekben, ami a HEK293-at felbecsülhetetlen értékű eszközzé teszi a genetikai vizsgálatok és a biotechnológia számára.

Ennek eredményeként a HEK293 sejtek a biotechnológia alapvető erőforrásává váltak a rekombináns fehérjék - köztük létfontosságú terápiás fehérjék - előállításában, valamint a vírusvektorok, különösen az adenovirális és lentivirális vektorok előállításához szükséges robusztus gazdasejtekké. A HEK 293 sejtek kulcsfontosságúak a gyógyszeriparban a nagy áteresztőképességű szűrővizsgálatokban, az egygénes rendellenességekkel kapcsolatos specifikus géneket célzó génterápiák előállításában és az adenovírus-fertőzéssel kapcsolatos vizsgálatokban.

Az ipari biotechnológiában a HEK293 humán sejtvonal hasznossága kiterjed a rekombináns enzimek előállítására, a vírusvektorok, például adenovirális vektorok előállítására, a fehérje előállítására és a bioszenzorok fejlesztésére. A toxikológiai kutatásokban a HEK-sejtvonal alkalmazása előnyös a vegyi anyagok sejtbiológiára gyakorolt hatásainak értékelésében, beleértve a tipikus vesesejtekre gyakorolt hatásokat és a génterápiák lehetőségeit. A HEK293 halhatatlan sejtvonalnak a natív fehérjék hatékony előállítására való képessége kiemeli alapvető szerepét az orvosi kutatásban, beleértve a rákkutatást és a génterápia alapjainak feltárását.

A HEK293 sejtek egyedülálló platformot kínálnak a sejtbiológia és az érdeklődésre számot tartó fehérjék tanulmányozásához, sokoldalúságban és hasznosságban felülmúlva más sejtvonalakat mind a kutatásban, mind az ipari alkalmazásokban. Ehhez képest a HEK293T sejteket, a HEK293 egyik változatát a transzfekciós hatékonyság növelése érdekében módosítják, a HEK293F sejteket szuszpenziós tenyésztésre adaptálják a nagyszabású fehérjeelőállítás megkönnyítése érdekében, és más emlős sejtvonalakat, például a majom veseszövetéből származó Vero sejteket elsősorban vakcinafejlesztésben és vírusos vizsgálatokban használják.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban