HEK293-celler

HEK293-cellelinjen, en udødelig epitelcellelinje, der stammer fra humane embryonale nyreceller i 1970'erne af Alex van der Eb ved universitetet i Utrecht, er blevet en central eksperimentel model inden for molekylærbiologi og bioteknologiske anvendelser på grund af dens bemærkelsesværdige alsidighed og lette genetiske manipulation.

Transformationen af HEK293-cellelinjen involverede integrationen af et specifikt segment fra Adenovirus 5-DNA, der indlejrede de adenovirale E1A- og E1B-gener i det cellulære genom. Den adenovirale DNA-modifikation muliggjorde cellelinjernes evne til at optage fremmed DNA effektivt, en funktion, der er kendt som høj transfektionseffektivitet. Integrationen af viralt DNA i HEK293-cellegenomet resulterede i cellulær udødelighed og forbedrede disse cellers anvendelighed i bioteknologiske applikationer betydeligt ved at lette den stabile inkorporering og ekspression af eksogent DNA, en proces, der kaldes stabil transfektion. Denne evne giver mulighed for vedvarende tilstedeværelse og funktion af fremmede gener i cellerne, hvilket gør HEK293 til et uvurderligt værktøj til genetiske studier og bioteknologi.

Derfor er HEK293-celler blevet en grundlæggende ressource inden for bioteknologi til produktion af rekombinante proteiner, herunder vitale terapeutiske proteiner, og de fungerer som robuste værtsceller til generering af virale vektorer, især adenovirale og lentivirale vektorer. HEK 293-celler er centrale i den farmaceutiske industri til højtydende screeningsanalyser, fremstilling af genterapier rettet mod specifikke gener i forbindelse med enkeltgenforstyrrelser og adenovirale infektionsstudier.

Inden for industriel bioteknologi anvendes den humane cellelinje HEK293 til rekombinant enzymproduktion, produktion af virale vektorer, f.eks. adenovirale vektorer, proteinproduktion og udvikling af biosensorer. Toksikologisk forskning drager fordel af anvendelsen af HEK-cellelinjen til at vurdere kemikaliers indvirkning på cellebiologien, herunder virkningerne på typiske nyreceller og potentialet for genterapi. Den udødelige cellelinje HEK293's evne til effektivt at producere native proteiner fremhæver deres vigtige rolle i medicinsk forskning, herunder kræftforskning og udforskning af grundlaget for genterapi.

HEK293-celler er en unik platform til at studere cellebiologi og interessante proteiner, og de overgår andre cellelinjer i alsidighed og anvendelighed i både forskning og industri. Til sammenligning er HEK293T-celler, en variant af HEK293, modificeret for at forbedre transfektionseffektiviteten, HEK293F-celler er tilpasset til suspensionskultur for at lette proteinproduktion i stor skala, og andre pattedyrcellelinjer som Vero-celler, der stammer fra abenyrevæv, bruges primært til vaccineudvikling og virusundersøgelser.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring