خلايا HEK293

أصبح الخط الخلوي HEK293، وهو خط خلوي طلائي غير مخلد مشتق من خلايا الكلى الجنينية البشرية في السبعينيات من القرن الماضي على يد أليكس فان دير إيب في جامعة أوتريخت، نموذجاً تجريبياً محورياً في البيولوجيا الجزيئية وتطبيقات التكنولوجيا الحيوية نظراً لتعدد استخداماته الملحوظ وسهولة التلاعب الجيني.

تضمن تحويل خط الخلية HEK293 دمج جزء محدد من الحمض النووي لفيروس الغدة الدرقية 5، ودمج جينات E1A و E1B الفيروسية الغدية داخل الجينوم الخلوي. وقد مكّن تعديل الحمض النووي الفيروسي الغدي من قدرة خطوط الخلايا على امتصاص الحمض النووي الأجنبي بكفاءة، وهي ميزة تُعرف بكفاءة نقل عالية. وأدى دمج الحمض النووي الفيروسي في جينوم الخلية HEK293 إلى تخليد خلوي وعزز بشكل كبير فائدة هذه الخلايا في تطبيقات التكنولوجيا الحيوية من خلال تسهيل الدمج المستقر والتعبير عن الحمض النووي الخارجي، وهي عملية تسمى نقل مستقر. تسمح هذه القدرة باستمرار وجود ووظيفة الجينات الغريبة داخل الخلايا مما يجعل من HEK293 أداة لا تقدر بثمن للدراسات الوراثية والتكنولوجيا الحيوية.

ونتيجة لذلك، أصبحت خلايا HEK293 موردًا أساسيًا في التكنولوجيا الحيوية لإنتاج البروتينات المؤتلفة، بما في ذلك البروتينات العلاجية الحيوية، كما أنها تعمل كخلايا مضيفة قوية لتوليد النواقل الفيروسية، وخاصة النواقل الفيروسية الغدية والفيروسية اللمفاوية. تُعد خلايا HEK 293 خلايا محورية في صناعة الأدوية لإجراء فحوصات الفحص عالية الإنتاجية، وتصنيع العلاجات الجينية التي تستهدف جينات محددة تتعلق باضطرابات الجين الواحد، ودراسات العدوى الفيروسية الغدية.

وفي مجال التكنولوجيا الحيوية الصناعية، تمتد فائدة خط الخلية البشرية HEK293 إلى إنتاج الإنزيمات المؤتلفة، وإنتاج النواقل الفيروسية، مثل نواقل الفيروسات الغدية وإنتاج البروتين وتطوير أجهزة الاستشعار الحيوية. تستفيد أبحاث علم السموم من تطبيق خط الخلايا البشرية HEK في تقييم تأثيرات المواد الكيميائية على بيولوجيا الخلايا، بما في ذلك التأثيرات على خلايا الكلى النموذجية وإمكانية العلاج الجيني. إن قدرة خط الخلايا الخالدة HEK293 على إنتاج بروتينات أصلية بكفاءة تسلط الضوء على دورها الأساسي في الأبحاث الطبية، بما في ذلك أبحاث السرطان واستكشاف أسس العلاج الجيني.

وتوفر خلايا HEK293 منصة فريدة لدراسة بيولوجيا الخلية والبروتينات ذات الأهمية، متجاوزةً بذلك خطوط الخلايا الأخرى من حيث تعدد الاستخدامات والفائدة في كل من التطبيقات البحثية والصناعية. وبالمقارنة، يتم تعديل خلايا HEK293T، وهي نوع من خلايا HEK293، لتعزيز كفاءة نقل العدوى، ويتم تكييف خلايا HEK293F لزراعة المعلقات لتسهيل إنتاج البروتين على نطاق واسع، وتستخدم خطوط خلايا الثدييات الأخرى مثل خلايا فيرو، المشتقة من أنسجة كلية القرد، بشكل أساسي في تطوير اللقاحات والدراسات الفيروسية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان