HEK293-solut

HEK293-solulinjasta, joka on kuolematon epiteelisolulinja, jonka Alex van der Eb johdatti 1970-luvulla Utrechtin yliopistossa ihmisen alkion munuaissoluista, on tullut keskeinen kokeellinen malli molekyylibiologiassa ja bioteknologisissa sovelluksissa sen huomattavan monipuolisuuden ja geneettisen manipuloinnin helppouden vuoksi.

HEK293-solulinjan transformaatioon liittyi Adenovirus 5 -DNA:n tietyn segmentin integrointi, joka sulautti adenoviruksen E1A- ja E1B-geenit solujen genomiin. Adenoviruksen DNA-muutos mahdollisti solulinjojen kyvyn ottaa tehokkaasti vastaan vierasta DNA:ta, mikä tunnetaan nimellä korkea transfektiotehokkuus. Viruksen DNA:n integrointi HEK293-solujen genomiin johti solujen kuolemattomuuteen ja lisäsi merkittävästi näiden solujen käyttökelpoisuutta bioteknologisissa sovelluksissa helpottamalla eksogeenisen DNA:n vakaata sisällyttämistä ja ilmentymistä, prosessia, jota kutsutaan vakaaksi transfektioksi. Tämä kyky mahdollistaa vieraiden geenien pysyvän läsnäolon ja toiminnan soluissa, mikä tekee HEK293:sta korvaamattoman arvokkaan työkalun geneettisiin tutkimuksiin ja biotekniikkaan.

Tämän seurauksena HEK293-soluista on tullut biotekniikan perusresurssi rekombinanttiproteiinien, myös elintärkeiden terapeuttisten proteiinien, tuotannossa ja ne toimivat vankkoina isäntäsoluina virusvektoreiden, erityisesti adenovirus- ja lentivirusvektoreiden, tuottamisessa. HEK 293 -solut ovat keskeisiä lääketeollisuudessa korkean läpimenon seulontamäärityksissä, yksittäisiin geenihäiriöihin liittyviin erityisiin geeneihin kohdistuvien geeniterapioiden valmistuksessa ja adenovirusinfektiotutkimuksissa.

Teollisessa bioteknologiassa HEK293-ihmissolulinjan hyöty ulottuu rekombinanttientsyymien tuotantoon, virusvektoreiden, kuten adenovirusvektoreiden, tuotantoon, proteiinien tuotantoon ja biosensoreiden kehittämiseen. Toksikologinen tutkimus hyötyy HEK-solulinjan käytöstä arvioitaessa kemikaalien vaikutuksia solubiologiaan, mukaan lukien vaikutukset tyypillisiin munuaissoluihin ja geeniterapioiden mahdollisuudet. Kuolemattoman HEK293-solulinjan kyky tuottaa tehokkaasti natiiviproteiineja korostaa sen keskeistä roolia lääketieteellisessä tutkimuksessa, kuten syöpätutkimuksessa ja geeniterapian perusteiden tutkimisessa.

HEK293-solut tarjoavat ainutlaatuisen alustan solubiologian ja kiinnostavien proteiinien tutkimiseen, ja ne ylittävät muut solulinjat monipuolisuudessaan ja käyttökelpoisuudessaan sekä tutkimuksessa että teollisissa sovelluksissa. Vertailun vuoksi HEK293T-soluja, HEK293:n muunnosta, muokataan transfektiotehokkuuden parantamiseksi, HEK293F-soluja mukautetaan suspensioviljelyä varten, jotta voidaan helpottaa laajamittaista proteiinien tuotantoa, ja muita nisäkässolulinjoja, kuten Vero-soluja, jotka on johdettu apinoiden munuaiskudoksesta, käytetään ensisijaisesti rokotteiden kehittämisessä ja virustutkimuksissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa