HEK293 Hücreleri

1970'lerde Utrecht Üniversitesi'nde Alex van der Eb tarafından insan embriyonik böbrek hücrelerinden türetilen ölümsüzleştirilmiş bir epitel hücre hattı olan HEK293 hücre hattı, olağanüstü çok yönlülüğü ve genetik manipülasyon kolaylığı nedeniyle moleküler biyoloji ve biyoteknolojik uygulamalarda önemli bir deneysel model haline gelmiştir.

HEK293 hücre hattının transformasyonu, Adenoviral E1A ve E1B genlerini hücresel genom içine yerleştiren Adenovirüs 5 DNA'sından belirli bir segmentin entegrasyonunu içeriyordu. Adenoviral DNA modifikasyonu, hücre hatlarının yüksek transfeksiyon verimliliği olarak bilinen bir özellik olan yabancı DNA'yı verimli bir şekilde alabilmesini sağladı. Viral DNA'nın HEK293 hücre genomuna entegrasyonu hücresel immortalizasyonla sonuçlanmış ve stabil transfeksiyon olarak adlandırılan bir süreç olan eksojen DNA'nın stabil bir şekilde dahil edilmesini ve ekspresyonunu kolaylaştırarak bu hücrelerin biyoteknolojik uygulamalardaki kullanımını önemli ölçüde artırmıştır. Bu özellik, yabancı genlerin hücreler içinde kalıcı olarak bulunmasını ve işlev görmesini sağlayarak HEK293'ü genetik çalışmalar ve biyoteknoloji için paha biçilmez bir araç haline getirmektedir.

Sonuç olarak, HEK293 hücreleri biyoteknolojide hayati önem taşıyan terapötik proteinler de dahil olmak üzere rekombinant proteinlerin üretimi için temel bir kaynak haline gelmiş ve viral vektörlerin, özellikle de adenoviral ve lentiviral vektörlerin üretimi için sağlam konak hücreler olarak hizmet vermektedir. HEK 293 hücreleri ilaç endüstrisinde yüksek verimli tarama deneyleri, tek gen bozukluklarıyla ilgili spesifik genleri hedefleyen gen terapilerinin üretimi ve adenoviral enfeksiyon çalışmaları için çok önemlidir.

Endüstriyel biyoteknolojide, HEK293 insan hücre hattının kullanımı rekombinant enzim üretimi, adenoviral vektörler gibi viral vektör üretimi, protein üretimi ve biyosensörlerin geliştirilmesine kadar uzanmaktadır. Toksikoloji araştırmaları, tipik böbrek hücreleri üzerindeki etkiler ve gen terapileri potansiyeli de dahil olmak üzere kimyasalların hücre biyolojisi üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesinde HEK hücre hattının uygulanmasından faydalanmaktadır. Ölümsüz hücre hattı HEK293'ün doğal proteinleri verimli bir şekilde üretme yeteneği, kanser araştırmaları ve gen terapisinin temellerini keşfetmek de dahil olmak üzere tıbbi araştırmalardaki temel rolünü vurgulamaktadır.

HEK293 hücreleri, hücre biyolojisini ve ilgilenilen proteinleri incelemek için benzersiz bir platform sunmakta ve hem araştırma hem de endüstriyel uygulamalarda çok yönlülük ve kullanım açısından diğer hücre hatlarını geride bırakmaktadır. Buna karşılık, HEK293'ün bir varyantı olan HEK293T hücreleri transfeksiyon verimliliğini artırmak için modifiye edilir, HEK293F hücreleri büyük ölçekli protein üretimini kolaylaştırmak için süspansiyon kültürüne uyarlanır ve maymun böbrek dokusundan türetilen Vero hücreleri gibi diğer memeli hücre hatları öncelikle aşı geliştirme ve viral çalışmalarda kullanılır.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın