Células HEK293

A linha de células HEK293, uma linha de células epiteliais imortalizadas derivada de células renais embrionárias humanas na década de 1970 por Alex van der Eb na Universidade de Utrecht, tornou-se um modelo experimental fundamental em biologia molecular e aplicações biotecnológicas devido à sua notável versatilidade e facilidade de manipulação genética.

A transformação da linha celular HEK293 envolveu a integração de um segmento específico do ADN do adenovírus 5, incorporando os genes adenovirais E1A e E1B no genoma celular. A modificação do ADN adenoviral permitiu a capacidade das linhas celulares para absorver eficazmente o ADN estranho, uma caraterística conhecida como elevada eficiência de transfecção. A integração do ADN viral no genoma da célula HEK293 resultou na imortalização celular e aumentou significativamente a utilidade destas células em aplicações biotecnológicas, facilitando a incorporação e expressão estáveis de ADN exógeno, um processo denominado transfecção estável. Esta capacidade permite a presença e a função persistentes de genes estranhos nas células, tornando a HEK293 uma ferramenta inestimável para estudos genéticos e biotecnológicos.

Consequentemente, as células HEK293 tornaram-se um recurso fundamental em biotecnologia para a produção de proteínas recombinantes, incluindo proteínas terapêuticas vitais, e servindo como células hospedeiras robustas para a geração de vectores virais, particularmente vectores adenovirais e lentivirais. As células HEK 293 são essenciais na indústria farmacêutica para ensaios de rastreio de elevado rendimento, para o fabrico de terapias genéticas que visam genes específicos relacionados com perturbações de um único gene e para estudos de infeção adenoviral.

Na biotecnologia industrial, a utilidade da linha celular humana HEK293 estende-se à produção de enzimas recombinantes, à produção de vectores virais, como os vectores adenovirais, à produção de proteínas e ao desenvolvimento de biossensores. A investigação toxicológica beneficia da aplicação da linha celular HEK na avaliação dos impactos dos produtos químicos na biologia celular, incluindo os efeitos nas células renais típicas e o potencial para terapias genéticas. A capacidade da linha celular imortal HEK293 para produzir eficientemente proteínas nativas realça o seu papel essencial na investigação médica, incluindo a investigação do cancro e a exploração das bases da terapia genética.

As células HEK293 oferecem uma plataforma única para o estudo da biologia celular e das proteínas de interesse, ultrapassando outras linhas celulares em termos de versatilidade e utilidade, tanto na investigação como em aplicações industriais. Em comparação, as células HEK293T, uma variante das HEK293, são modificadas para aumentar a eficiência da transfecção, as células HEK293F são adaptadas para cultura em suspensão para facilitar a produção de proteínas em grande escala e outras linhas celulares de mamíferos, como as células Vero, derivadas de tecido renal de macaco, são utilizadas principalmente no desenvolvimento de vacinas e em estudos virais.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia