HEK293-Zellen

Die HEK293-Zelllinie, eine immortalisierte Epithelzelllinie, die in den 1970er Jahren von Alex van der Eb an der Universität Utrecht aus menschlichen embryonalen Nierenzellen abgeleitet wurde, ist aufgrund ihrer bemerkenswerten Vielseitigkeit und leichten genetischen Manipulierbarkeit zu einem zentralen Versuchsmodell in der Molekularbiologie und für biotechnologische Anwendungen geworden.

Die Transformation der HEK293-Zelllinie erfolgte durch die Integration eines spezifischen Abschnitts der Adenovirus-5-DNA, der die adenoviralen Gene E1A und E1B in das zelluläre Genom einbettete. Die adenovirale DNA-Modifikation ermöglichte es den Zelllinien, fremde DNA effizient aufzunehmen, eine Eigenschaft, die als hohe Transfektionseffizienz bekannt ist. Die Integration der viralen DNA in das HEK293-Zellgenom führte zu einer zellulären Immortalisierung und verbesserte den Nutzen dieser Zellen für biotechnologische Anwendungen erheblich, indem sie den stabilen Einbau und die Expression von exogener DNA erleichterte, ein Prozess, der als stabile Transfektion bezeichnet wird. Diese Fähigkeit ermöglicht das dauerhafte Vorhandensein und die Funktion von Fremdgenen in den Zellen und macht HEK293 zu einem unschätzbaren Werkzeug für genetische Studien und Biotechnologie.

Infolgedessen sind HEK293-Zellen zu einer grundlegenden Ressource in der Biotechnologie für die Herstellung rekombinanter Proteine, einschließlich lebenswichtiger therapeutischer Proteine, geworden und dienen als robuste Wirtszellen für die Herstellung viraler Vektoren, insbesondere adenoviraler und lentiviraler Vektoren. HEK 293-Zellen sind in der pharmazeutischen Industrie von zentraler Bedeutung für Hochdurchsatz-Screening-Assays, die Herstellung von Gentherapien, die auf spezifische Gene im Zusammenhang mit Einzelgenerkrankungen abzielen, und für Studien zur Adenovirusinfektion.

In der industriellen Biotechnologie erstreckt sich der Nutzen der menschlichen Zelllinie HEK293 auf die Produktion rekombinanter Enzyme, die Herstellung viraler Vektoren, wie z. B. adenoviraler Vektoren, die Proteinproduktion und die Entwicklung von Biosensoren. Die Toxikologieforschung profitiert von der Anwendung der HEK-Zelllinie bei der Bewertung der Auswirkungen von Chemikalien auf die Zellbiologie, einschließlich der Auswirkungen auf typische Nierenzellen und des Potenzials für Gentherapien. Die Fähigkeit der unsterblichen Zelllinie HEK293, effizient native Proteine zu produzieren, unterstreicht ihre wichtige Rolle in der medizinischen Forschung, einschließlich der Krebsforschung und der Erforschung der Grundlagen der Gentherapie.

HEK293-Zellen bieten eine einzigartige Plattform für die Untersuchung der Zellbiologie und von Proteinen, die von Interesse sind, und übertreffen andere Zelllinien in Bezug auf Vielseitigkeit und Nützlichkeit sowohl in der Forschung als auch bei industriellen Anwendungen. Im Vergleich dazu werden HEK293T-Zellen, eine Variante von HEK293, modifiziert, um die Transfektionseffizienz zu verbessern, HEK293F-Zellen werden für Suspensionskulturen angepasst, um die Proteinproduktion in großem Maßstab zu erleichtern, und andere Säugetierzelllinien wie Vero-Zellen, die aus Affennierengewebe gewonnen werden, werden hauptsächlich für die Entwicklung von Impfstoffen und virale Studien verwendet.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung