Zum Inhalt springen
HEK293T/17
Gewebe
Embryonale Niere
Synonyme
HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17

Dokumente

HEK293T/17

Cell line · Artikelnummer 305117

The 293T/17 cell line is an immortalized variant of the HEK293 line, derived from human embryonic kidney cells and extensively utilized in research, parti...

€550.00zzgl. MwSt. und Versandkosten
Auf Lager
Charge
Empfohlen (frischeste Charge)
  • CoA
  • CoA
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie 293T/17 ist eine immortalisierte Variante der HEK293-Linie, die von menschlichen embryonalen Nierenzellen abstammt und in der Forschung, insbesondere bei der Untersuchung und Herstellung von retroviralen und lentiviralen Vektoren, intensiv genutzt wird. Diese Zelllinie wurde so modifiziert, dass sie das SV40 large T-Antigen exprimiert, was ihre Nützlichkeit bei der Herstellung viraler Vektoren erhöht. Die Expression des großen SV40-T-Antigens ist eine Schlüsseleigenschaft, die es diesen Zellen ermöglicht, Plasmide zu replizieren, die den SV40-Replikationsursprung enthalten, wodurch die Ausbeute an Plasmid-DNA bei transienten Transfektionsverfahren erheblich gesteigert wird. Diese Eigenschaft ist besonders vorteilhaft für die Herstellung von viralen Vektoren.

293T/17-Zellen sind für die Produktion von viralen Vektoren wie Retroviren und Lentiviren unerlässlich. Aufgrund ihrer Fähigkeit, transfizierte Plasmide zu amplifizieren und die virale Assemblierung und Freisetzung zu unterstützen, produzieren sie effizient virale Partikel. Dies macht sie zu einem wichtigen Instrument in der Gentherapieforschung, wo diese Vektoren verwendet werden, um genetisches Material in Wirtszellen einzubringen. Die Zellen weisen eine hohe Transfektionseffizienz auf, die für die erfolgreiche Einführung und Expression von Fremd-DNA bei der Konstruktion von Vektoren entscheidend ist. Diese hohe Effizienz ermöglicht die Untersuchung der Genfunktion und die effektive Herstellung rekombinanter Proteine.

Die robusten Eigenschaften der Zelllinie 293T/17 machen sie sowohl für die wissenschaftliche Grundlagenforschung als auch für therapeutische Anwendungen unersetzlich. Sie wird in der Molekularbiologie und Gentechnik häufig für die Proteinexpression, die Analyse von Genfunktionen und die Entwicklung neuer Gentherapien eingesetzt. Die Effizienz der Zelllinie bei der Herstellung viraler Vektoren erleichtert Experimente, bei denen genetisches Material zugeführt werden muss, und macht sie zu einem Eckpfeiler auf dem Gebiet der Virologie. Die Zelllinie 293T/17 spielt weiterhin eine zentrale Rolle bei der Erforschung der Genfunktion und der Entwicklung von therapeutischen Maßnahmen.

Gewebe
Embryonale Niere
Anwendungen
Diese Zelllinie ist eine optimale Wahl für Transfektion, Hochdurchsatz-Screening, Toxikologie und Impfstoffentwicklung.
Synonyme
  • HEK293T/17
  • HEK-293T/17
  • HEK 293T/17

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This HEK293T/17 cell line contains SV40, enhancing plasmid replication and packaging efficiency. The insert is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
HEK293T/17 (Cytion Katalognummer 305117)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1926

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
SV40 T-Antigen
Viren
SV40 (exprimiert das SV40 T-Antigen)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Fötus