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HEK293T/17
ティッシュ
胚性腎臓
同義語
HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17

HEK293T/17

Cell line · 製品番号 305117

The 293T/17 cell line is an immortalized variant of the HEK293 line, derived from human embryonic kidney cells and extensively utilized in research, parti...

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01概要

説明

293T/17細胞株は、ヒト胚性腎臓細胞由来のHEK293株の不死化変異株で、研究、特にレトロウイルスおよびレンチウイルスベクターの研究および生産に広く利用されている。この細胞株は、SV40ラージT抗原を発現するように改変されており、ウイルスベクター生産における有用性を高めている。SV40ラージT抗原の発現は、この細胞がSV40複製起点を含むプラスミドを複製することを可能にする重要な特徴であり、一過性トランスフェクション手順におけるプラスミドDNAの収量を著しく増加させる。この特徴は、特にウイルスベクターの生産に有益である。

293T/17細胞は、レトロウイルスやレンチウイルスのようなウイルスベクターの生産に不可欠である。293T/17細胞は、トランスフェクトされたプラスミドを増幅し、ウイルスの組み立てと放出をサポートする能力により、効率的にウイルス粒子を産生する。このため、これらのベクターが宿主細胞に遺伝物質を導入するために使用される遺伝子治療研究において、重要なツールとなる。この細胞は高いトランスフェクション効率を示し、ベクター構築時に外来DNAの導入と発現を成功させるために極めて重要である。この高い効率は、遺伝子機能の研究と組換えタンパク質の効率的な生成を可能にする。

293T/17細胞株の堅固な能力は、基礎科学研究と治療応用の両方にとって貴重なものである。293T/17細胞株は、分子生物学および遺伝子工学において、タンパク質発現、遺伝子機能解析、新規遺伝子治療の開発などに広く用いられている。293T/17細胞株は、ウイルスベクターの生産効率が高いため、遺伝物質の導入が必要な実験が容易であり、ウイルス学分野の要となっている。293T/17細胞株は、遺伝子機能の理解を進め、治療的介入を開発する上で極めて重要な役割を果たし続けている。

ティッシュ
胚性腎臓
用途
この細胞株は、トランスフェクション、ハイスループットスクリーニング、毒性学、ワクチン開発に最適な選択である。
同義語
  • HEK293T/17
  • HEK-293T/17
  • HEK 293T/17

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This HEK293T/17 cell line contains SV40, enhancing plasmid replication and packaging efficiency. The insert is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮

04識別子

引用
HEK293T/17(Cytion カタログ番号 305117)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_1926

05発現と感受性

抗原発現
SV40 T抗原
ウイルス
SV40(SV40のT抗原を発現)

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
胎児