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HEK293-F細胞
ティッシュ
腎臓
同義語
HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F

HEK293-F細胞

Cell line · 製品番号 300260

HEK293-F細胞は、ヒト胚腎293(HEK293)細胞株から派生した、増殖が速く、トランスフェクション効率の高い亜株です。「F」という表記は……

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01概要

説明

HEK293-F細胞は、ヒト胚性腎臓293(HEK293)細胞株に由来する、増殖が速く、高度にトランスフェクション可能なサブラインである。F'の名称は、これらの細胞が懸濁培養での増殖に適合していることを示し、大規模なタンパク質生産に特に有用である。この細胞は様々な無血清培地で増殖するため、バイオテクノロジーや製薬アプリケーションにおけるスケーラブルなプロセスを促進する。HEK293-F細胞は、親HEK293株の上皮様形態を保持し、固体基質に接着する必要なく懸濁状態で維持される。

これらの細胞は組換えタンパク質の発現効率が高く、アデノウイルス、レンチウイルス、レトロウイルスベクターなどの遺伝子治療用ウイルスベクターの生産に広く利用されている。懸濁液中で強固に増殖し、トランスフェクションが容易であることから、トランスフェクション後数日以内に高収率のタンパク質を生産できる一過性のトランスフェクション・プロトコールでの使用に理想的である。この特性は、研究および産業環境における迅速な生産サイクルに不可欠である。HEK293-F細胞の様々な増殖条件への適応性と高密度培養能力は、バイオプロセス環境における有用性を高めている。

ティッシュ
腎臓
用途
トランスフェクション宿主
同義語
  • HEK-293-F
  • HEK 293-F
  • HEK-293F
  • HEK293F
  • 293-F
  • 293 F
  • 293F

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
サスペンション
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This HEK293-F cell line contains SV40, enabling high transfection efficiency and robust growth in suspension culture. The modification is stably present in embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
腫瘍形成性
ヌードマウス
倍増時間
30時間

04識別子

引用
HEK293-F (Cytion カタログ番号 300260)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_6642

05発現と感受性

発現している受容体
ビトロネクチン
タンパク質の発現
CEA陰性、p53陽性
ウイルス
アデノウイルス5 DNAで形質転換 アデノウイルス5 DNAで形質転換

06取り扱いと飼育

培地
CD293(Thermo)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
10⁴細胞/cm²の密度で播種した場合、約4日で密接層が形成される
流体の更新
週2回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
胎児