الانتقال إلى المحتوى
خلايا HEK293-F
الأنسجة
الكلى
المرادفات
HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F

المستندات

خلايا HEK293-F

Cell line · رقم المنتج 300260

خلايا HEK293-F هي سلالة فرعية سريعة النمو وقابلة للتحويل الجيني بدرجة عالية، مشتقة من سلالة الخلايا الكلوية الجنينية البشرية 293 (HEK293). ويشير الحرف «F» إلى...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

إن خلايا HEK293-F هي سلالة فرعية سريعة النمو وقابلة للنقل بشكل كبير مشتقة من خط خلايا الكلى الجنينية البشرية 293 (HEK293). تشير التسمية "F" إلى أن هذه الخلايا قد تم تكييفها للنمو في مزارع معلقة مما يجعلها مفيدة بشكل خاص لإنتاج البروتين على نطاق واسع. تنمو هذه الخلايا في مجموعة متنوعة من الوسائط الخالية من المصل، مما يسهل العمليات القابلة للتطوير في تطبيقات التكنولوجيا الحيوية والصيدلانية. تحتفظ خلايا HEK293-F بالمورفولوجيا الشبيهة بالظهارة في خط HEK293 الأصلي ويتم الحفاظ عليها في التعليق دون الحاجة إلى التعلق بركيزة صلبة.

وتتميز هذه الخلايا بكفاءة عالية في التعبير عن البروتينات المؤتلفة وتستخدم على نطاق واسع في إنتاج النواقل الفيروسية للعلاج الجيني، بما في ذلك النواقل الفيروسية الغدية والفيروسية اللمفاوية والفيروسية القهقرية. كما أن نموها القوي في المعلق وسهولة نقلها يجعلها مثالية للاستخدام في بروتوكولات النقل العابر، حيث يمكنها إنتاج غلة عالية من البروتين في غضون أيام قليلة بعد النقل. وتعد هذه الخاصية بالغة الأهمية لدورات الإنتاج السريع في البيئات البحثية والصناعية. وتعزز قدرة خلايا HEK293-F على التكيف مع ظروف النمو المختلفة وقدرتها على الاستزراع بكثافة عالية من فائدتها في بيئات المعالجة الحيوية.

الأنسجة
الكلى
التطبيقات
مضيف نقل العدوى
المرادفات
  • HEK-293-F
  • HEK 293-F
  • HEK-293F
  • HEK293F
  • 293-F
  • 293 F
  • 293F

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
التعليق
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This HEK293-F cell line contains SV40, enabling high transfection efficiency and robust growth in suspension culture. The modification is stably present in embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
في الفئران العارية
زمن المضاعفة
30 ساعة

04المعرّفات

المرجع
HEK293-F (كتالوج سيتيون رقم 300260)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_6642

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
فيترونكتين
التعبير البروتيني
CEA سلبي، p53 إيجابي
الفيروسات
متحوِّل مع الحمض النووي الغدي 5 DNA الغدي 5 DNA الغدي 5

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
CD293 (ثيرمو)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2 ستنتج طبقة متقاربة في حوالي 4 أيام
تجديد السوائل
2 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
الجنين