Células HEK293-F

As células HEK293-F são uma sublinha de crescimento rápido e altamente transfectável, derivada da linhagem celular renal embrionária humana 293 (HEK293). A designação “F” indica que essas células foram adaptadas para o crescimento em culturas em suspensão, tornando-as particularmente úteis para a produção de proteínas em grande escala. As células crescem em diversos meios livres de soro, facilitando processos escaláveis em aplicações biotecnológicas e farmacêuticas. As células HEK293-F mantêm a morfologia semelhante à epitelial da linhagem-mãe HEK293 e são mantidas em suspensão sem a necessidade de aderência a um substrato sólido.

Essas células são altamente eficientes na expressão de proteínas recombinantes e são amplamente utilizadas na produção de vetores virais para terapia gênica, incluindo vetores adenovirais, lentivirais e retrovirais. Seu crescimento robusto em suspensão e a facilidade de transfecção as tornam ideais para uso em protocolos de transfecção transitória, nos quais podem produzir altos rendimentos de proteína poucos dias após a transfecção. Essa característica é fundamental para ciclos de produção rápidos em ambientes de pesquisa e industriais. A adaptabilidade das células HEK293-F a diversas condições de crescimento e sua capacidade de cultura em alta densidade aumentam sua utilidade em ambientes de bioprocessamento.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.