Tartalomra ugrás
HEK293-F sejtek
Szövet
Vese
Szinonimák
HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F

Dokumentumok

HEK293-F sejtek

Cell line · Termékszám 300260

A HEK293-F sejtek egy gyorsan szaporodó, kiválóan transzfektálható alvonal, amely az emberi embrionális vese 293 (HEK293) sejtvonalból származik. Az „F” jelölés azt jelzi...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HEK293-F sejtek a humán embrionális vese 293 (HEK293) sejtvonalból származó, gyorsan növekvő, jól transzfektálható alvonal. Az "F" jelölés azt jelzi, hogy ezeket a sejteket szuszpenziós kultúrákban történő növekedésre adaptálták, ami különösen hasznos a nagyléptékű fehérje előállításához. A sejtek számos szérummentes közegben növekednek, megkönnyítve a biotechnológiai és gyógyszeripari alkalmazásokban a skálázható folyamatokat. A HEK293-F sejtek megtartják az eredeti HEK293 vonal epithelszerű morfológiáját, és szuszpenzióban tarthatók, szilárd szubsztrátumhoz való rögzítés nélkül.

Ezek a sejtek rendkívül hatékonyan expresszálják a rekombináns fehérjéket, és széles körben használják őket génterápiás célú vírusvektorok, többek között adenovirális, lentivirális és retrovirális vektorok előállítására. Szuszpenzióban való robusztus növekedésük és könnyű transzfekciójuk miatt ideálisak a tranziens transzfekciós protokollokban való felhasználásra, ahol a transzfekciót követő néhány napon belül nagy mennyiségű fehérjét tudnak előállítani. Ez a tulajdonság kritikus fontosságú a kutatási és ipari környezetben a gyors termelési ciklusok szempontjából. A HEK293-F sejtek különböző növekedési feltételekhez való alkalmazkodóképessége és a nagy sűrűségű tenyésztésre való képességük növeli hasznosságukat a biotechnológiai környezetekben.

Szövet
Vese
Alkalmazások
Transzfekciós gazdatest
Szinonimák
  • HEK-293-F
  • HEK 293-F
  • HEK-293F
  • HEK293F
  • 293-F
  • 293 F
  • 293F

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This HEK293-F cell line contains SV40, enabling high transfection efficiency and robust growth in suspension culture. The modification is stably present in embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Meztelen egerekben
Kettőzési idő
30 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
HEK293-F (Cytion katalógusszám: 300260)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_6642

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Vitronectin
Fehérjeexpresszió
CEA negatív, p53 pozitív
Vírusok
Adenovírus 5 DNS-sel átalakítva adenovírus 5 DNS-sel

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
CD293 (Thermo)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2 körülbelül 4 nap alatt konfluens réteget képez.
Folyadékcsere
hetente 2 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Magzat