Skip to content
תאי HEK293-F
Tissue
כליה
Synonyms
HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F

Documents

תאי HEK293-F

Cell line · Product number 300260

HEK293-F cells are a fast-growing, highly transfectable subline derived from the human embryonic kidney 293 (HEK293) cell line. The 'F' designation indica...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי HEK293-F הם תת-קו תאים הצומחים במהירות וניתנים להנדסה גנטית בקלות, הנגזרים מקו התאים 293 של כליה עוברית אנושית (HEK293). האות 'F' מציינת שתאים אלה הותאמו לצמיחה בתרבויות תאים בתמיסה, מה שהופך אותם לשימושיים במיוחד לייצור חלבונים בקנה מידה גדול. התאים צומחים במגוון מצעי גידול נטולי סרום, מה שמקל על תהליכים הניתנים להרחבה ביישומים ביוטכנולוגיים ופרמצבטיים. תאי HEK293-F שומרים על המורפולוגיה האפיתלית של קו HEK293 ההורי ונשמרים בתרבית תאים בתמיסה ללא צורך בהיצמדות למצע מוצק.

תאים אלה יעילים ביותר בביטוי חלבונים רקומביננטיים ומשמשים רבות בייצור וקטורים נגיפיים לטיפול גנטי, כולל וקטורים אדנו-נגיפיים, לנטו-נגיפיים ורטרו-נגיפיים. צמיחתם החזקה בתרבית בתמיסה וקלות הטרנספקציה שלהם הופכות אותם לאידיאליים לשימוש בפרוטוקולי טרנספקציה זמניים, בהם הם יכולים לייצר תשואות גבוהות של חלבון בתוך מספר ימים לאחר הטרנספקציה. מאפיין זה הוא קריטי למחזורי ייצור מהירים במחקר ובסביבות תעשייתיות. יכולת ההסתגלות של תאי HEK293-F לתנאי גידול שונים ויכולתם לגידול בצפיפות גבוהה משפרות את השימושיות שלהם בסביבות ביו-עיבוד.

Tissue
כליה
Applications
מארח טרנספקציה
Synonyms
  • HEK-293-F
  • HEK 293-F
  • HEK-293F
  • HEK293F
  • 293-F
  • 293 F
  • 293F

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HEK293-F cell line contains SV40, enabling high transfection efficiency and robust growth in suspension culture. The modification is stably present in embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
בעכברים עירומים
Doubling time
30 שעות

04Identifiers

Citation
HEK293-F (מספר קטלוגי Cytion 300260)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6642

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
ויטרונקטין
Protein expression
CEA שלילי, p53 חיובי
Viruses
הוסב באמצעות DNA של אדנווירוס 5 DNA של אדנווירוס 5

06Handling and culture

Culture medium
CD293 (Thermo)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה צפופה תוך כ-4 ימים.
Fluid renewal
פעמיים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
עובר