HEK293 suspension-adapted
Cell line · Product number 300686
The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים HEK293 המותאם לתרבית בתמיסה הוא וריאנט של תאי הכליה העוברית האנושית 293 (HEK293) שעבר שינוי כדי לגדול בתרבית בתמיסה במקום בתרבית דבקה. התאמה זו משמעותית ליישומים תעשייתיים שבהם נדרשת ייצור חלבונים בקנה מידה גדול. התאים שומרים על רבים ממאפייני קו HEK293 המקורי, כולל יעילות טרנספקציה חזקה ויכולת לשנות חלבונים מבוטאים לאחר תרגום באופן דומה לזה של תאים אנושיים טבעיים.
תאים אלה מוערכים במיוחד בתעשיות הביוטכנולוגיה והפרמצבטיקה לייצור חלבונים ויראליים רקומביננטיים לטיפול גנטי ופיתוח חיסונים. ההתאמה לתרבית בתמיסה מאפשרת קנה מידה קל יותר ומפשטת את תהליך הקציר, מה שהופך אותה למתאימה יותר לעיבוד ביולוגי בקנה מידה מסחרי. קו התאים HEK293 המותאם לתרבית בתמיסה תומך במערכות ייצור נגיפיות שונות, כולל אדנו-וירוס, לנטוירוס ונגיף אדנו-אסוציאטיבי (AAV), המהווים מרכיב מרכזי ביישומים טיפוליים ובמחקר.
בסך הכל, קו התאים HEK293 המותאם לתרבית בתמיסה הוא כלי חיוני בתחומי הביולוגיה המולקולרית והעיבוד הביולוגי, המספק פלטפורמה רב-תכליתית לייצור מולקולות ביולוגיות פעילות שונות. קלות המניפולציה הגנטית שלו ויכולתו לייצר חלבונים המקופלים כהלכה ועוברים שינוי פוסט-תרגומי בהתאם לדפוסים של תאים אנושיים, הופכים אותו למשאב חיוני בסביבות טיפוליות ומחקריות מתקדמות רבות.
- Tissue
- כליה
- Applications
- מארח טרנספקציה
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- עגול
- Tumourigenic
- בעכברים עירומים
04Identifiers
- Citation
- HEK293 מותאם לתמיסה (מספר קטלוגי Cytion 300686)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0045
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- ויטרונקטין
- Protein expression
- CEA שלילי, p53 חיובי
- Virus susceptibility
- הוסב באמצעות DNA של אדנווירוס 5 DNA של אדנווירוס 5
06Handling and culture
- Culture medium
- Panserin 293S (PanBiotech, גרמניה)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- אין צורך בתוספים
- Dissociation reagent
- לא נדרש
- Subculturing
- שמרו על תאי התרחיף בצפיפות תאים שבין 5 x 105 ל-2-3 x 106 תאים/מ"ל בצלוחיות תרבית תאים Eppendorf על מנער בתוך אינקובטור בטמפרטורה של 37°C/5% CO2. בצעו תרבית משנה ברגע שצפיפות התאים הגיעה ל-2-3 x 106 תאים/מ"ל. הפרידו את התאים בזהירות כדי למנוע היווצרות אשכולות. ברגע שצפיפות התאים מגיעה ל-1-2 x 106 תאים/מ"ל, אסוף את התאים באמצעות צנטריפוגה ב-200xg למשך 5 דקות וזורק את הנוזל העליון. דלל בנפח מתאים של מצע תרבית טרי ומחומם מראש וספור את התאים כדי לקבל מידע על חיוניותם ומספרם. אסוף את התאים באמצעות צנטריפוגה ב-200xg למשך 5 דקות וזורק את הנוזל העליון. השב את התאים לתמיסה בהיקף מתאים של חומר הקפאה וספור אותם שוב. חיוניות התאים צריכה להיות >>80%, מומלצת צפיפות תאים של 5-10 מיליון תאים/מ"ל. יש להזליף את התאים לתוך מבחנות הקפאה מסומנות מראש. יש להשתמש במיכל הקפאה CoolCell או במקפיא בקרת טמפרטורה כדי להבטיח קצב קירור של 1°C/דקה.
- Seeding density
- 5 x 105 תאים/מ"ל
- Post-thaw recovery
- התחל את התרבויות בצפיפות של 5 x 105 תאים/מ"ל ושמור על ריכוז תאים של 2-3 x 106 תאים/מ"ל לצורך צמיחה מיטבית. דגיר בטמפרטורה של 37°C/5% CO2 במנער תאים במהירות של 100-150 סל"ד.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- עובר
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)
