Gå direkt till innehållet
HEK293 suspension-adapted
Vävnad
Njurar

HEK293 suspension-adapted

Cell line · Produktnummer 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

HEK293 suspension-adapted cell line är en variant av HEK293-cellerna (Human Embryonic Kidney 293) som har modifierats för att växa i suspensionskultur i stället för i adherent kultur. Denna anpassning är viktig för industriella tillämpningar där storskalig proteinproduktion krävs. Cellerna bibehåller många av egenskaperna hos den ursprungliga HEK293-linjen, inklusive en robust transient transfektionseffektivitet och förmågan att posttranslationellt modifiera uttryckta proteiner på ett sätt som liknar det hos nativa mänskliga celler.

Dessa celler är särskilt uppskattade inom bioteknik- och läkemedelsindustrin för produktion av rekombinanta proteiner och virus för genterapi och vaccinutveckling. Anpassningen till suspensionskultur möjliggör enklare skalbarhet och förenklar skördeprocessen, vilket gör den mer lämplig för bioprocesser i kommersiell skala. Den suspensionsanpassade cellinjen HEK293 stöder olika virala produktionssystem, inklusive adenovirus, lentivirus och adenoassocierat virus (AAV), som är centrala i terapeutiska tillämpningar och forskning.

Sammantaget är HEK293-cellinjen ett viktigt verktyg inom molekylärbiologi och bioprocessing, eftersom den utgör en mångsidig plattform för produktion av olika biologiskt aktiva molekyler. Dess enkla genetiska manipulering och förmåga att producera proteiner som är korrekt veckade och posttranslationellt modifierade enligt mänskliga cellmönster gör den till en oumbärlig resurs i många avancerade terapeutiska och forskningsmiljöer.

Vävnad
Njurar
Ansökningar
Värd för transfektion

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Upphängning
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Runda
Tumörframkallande
I nakna möss

04Identifierare

Källa
HEK293 suspension-adapted (Cytion katalognummer 300686)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05Uttryck och mottaglighet

Receptorer som uttrycks
Vitronektin
Proteinexpression
CEA-negativ, p53-positiv
Virusmottaglighet
Transformerad med adenovirus 5 DNA adenovirus 5 DNA

06Hantering och odling

Odlingsmedium
Panserin 293S (PanBiotech, Tyskland)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Inga kosttillskott krävs
Dissociationsmedel
Inte nödvändigt
Vidareodling
Håll suspensionscellerna vid en celltäthet mellan 5 x 105 och 2-3 x 106 celler/ml i Eppendorf-cellodlingsflaskor på en skakapparat i en inkubator vid 37 °C/5 % CO2. Subkultivera när celltätheten har nått 2-3 x 106 celler/ml. Lossa cellerna försiktigt för att undvika kluster. När celltätheten 1-2 x 106 celler/ml har uppnåtts, samla upp cellerna genom centrifugering vid 200xg i 5 minuter och kasta bort supernatanten. Späd ut i en lämplig volym färskt, förvärmt odlingsmedium och räkna cellerna för att få information om cellernas livskraft och antal. Samla upp cellerna genom centrifugering vid 200 x g i 5 minuter och kasta bort supernatanten. Resuspendera cellerna i lämplig volym frysmiljö och räkna dem igen. Cellernas livskraft bör vara >>80 %, en celltäthet på 5–10 miljoner celler/ml rekommenderas. Pipettera cellerna i förmärkta kryorör. Använd antingen CoolCell-frysbehållare eller en frys med kontrollerad hastighet för att säkerställa en kylningshastighet på 1 °C/min.
Såtäthet
5 x 105 celler/ml
Återhämtning efter upptining
Initiera odlingar med en densitet på 5 x 105 celler/ml och håll cellkoncentrationen uppe på 2-3 x 106 celler/ml för optimal tillväxt. Inkubera vid 37 °C/5 % CO2 på en cellskakare vid 100-150 rpm.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryopreserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
Foster