Přejít na obsah
HEK293 suspension-adapted
Tkáň
Ledviny

Dokumenty

HEK293 suspension-adapted

Cell line · Číslo výrobku 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie HEK293 adaptovaná na suspenzi je variantou buněk lidské embryonální ledviny 293 (HEK293), která byla upravena tak, aby rostla v suspenzi namísto v adherentní kultuře. Tato úprava je důležitá pro průmyslové aplikace, kde je vyžadována rozsáhlá produkce proteinů. Buňky si zachovávají mnoho vlastností původní linie HEK293, včetně robustní účinnosti transientní transfekce a schopnosti posttranslačně modifikovat exprimované proteiny podobně jako nativní lidské buňky.

Tyto buňky jsou ceněny zejména v biotechnologickém a farmaceutickém průmyslu pro výrobu rekombinantních proteinů a virů pro genovou terapii a vývoj vakcín. Přizpůsobení suspenzní kultuře umožňuje snadnější škálovatelnost a zjednodušuje proces sklizně, což je vhodnější pro komerční bioprocesy. Buněčná linie HEK293 adaptovaná na suspenzní kulturu podporuje různé systémy produkce virů, včetně adenoviru, lentiviru a adenoasociovaného viru (AAV), které jsou klíčové pro terapeutické aplikace a výzkum.

Celkově je buněčná linie HEK293 adaptovaná na suspenzi klíčovým nástrojem v oblasti molekulární biologie a bioprocesingu, který poskytuje univerzální platformu pro produkci různých biologicky aktivních molekul. Její snadná genetická manipulace a schopnost produkovat proteiny, které jsou správně složené a posttranslačně modifikované podle vzorů lidských buněk, z ní činí nepostradatelný zdroj v mnoha pokročilých terapeutických a výzkumných prostředích.

Tkáň
Ledviny
Aplikace
Transfekční hostitel

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Odpružení
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Kulaté
Tumorogenní
U nahých myší

04Identifikátory

Citace
HEK293 adaptovaná suspenze (katalogové číslo Cytion 300686)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
Vitronektin
Exprese proteinů
CEA negativní, p53 pozitivní
Náchylnost k virům
Transformované pomocí adenovirusové 5 DNA adenovirusové 5 DNA

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
Panserin 293S (PanBiotech, Německo)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Nejsou nutné žádné doplňky
Disociační činidlo
Není vyžadováno
Subkultivace
Udržujte suspenzní buňky v hustotě mezi 5 x 105 a 2-3 x 106 buněk/ml v Eppendorfových lahvích na buněčné kultivaci na třepačce v inkubátoru při teplotě 37 °C/5 % CO2. Jakmile hustota buněk dosáhne 2-3 x 106 buněk/ml, proveďte subkultivaci. Buňky opatrně uvolněte, aby nedošlo k jejich shlukování. Jakmile je dosaženo buněčné hustoty 1–2 x 106 buněk/ml, buňky se odeberou centrifugací při 200 x g po dobu 5 minut a supernatant se zlikviduje. Zřeďte v odpovídajícím objemu čerstvého, předehřátého kultivačního média a spočítejte buňky, abyste získali informace o životaschopnosti a počtu buněk. Buňky se shromáždí centrifugací při 200xg po dobu 5 minut a supernatant se zlikviduje. Buňky se resuspendují v odpovídajícím objemu mrazicího média a znovu se spočítají. Životaschopnost buněk by měla být >>80 %, doporučuje se hustota buněk 5–10 milionů buněk/ml. Pipetujte buňky do předem označených kryovialek. Použijte buď mrazicí nádobu CoolCell, nebo mrazák s řízenou rychlostí, aby byla zajištěna rychlost ochlazování 1 °C/min.
Hustota výsevu
5 x 105 buněk/ml
Zotavení po rozmrazení
Kultury zahajte při hustotě 5 x 105 buněk/ml a pro optimální růst udržujte koncentraci buněk na úrovni 2–3 x 106 buněk/ml. Inkubujte při teplotě 37 °C/5 % CO2 na buněčném třepačce při 100–150 ot./min.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Plod