Buňky HEK293T

HEK 293T, vysoce transfektabilní derivát rodičovské buňky HEK 293, je všestranným a výkonným nástrojem v oblasti biotechnologií pro výrobu rekombinantních proteinů a různých typů vakcín.

Buňky HEK 293T byly vytvořeny transfekcí buněk embryonální ledviny 293 plazmidem kódujícím velký T antigen SV40. Původní buněčná linie HEK293 byla vyvinuta z epiteliálních buněk tkáně lidské embryonální ledviny, přičemž k její transformaci došlo při 293. experimentu, který vědci provedli.

V oblasti vývoje vakcín jsou buňky embryonální ledviny 293T klíčové pro produkci virových vektorů, včetně adenovirových vektorů. Buňky HEK293T jsou za specifických kultivačních podmínek transfekovány vektory nesoucími adenovirové a retrovirové prvky, včetně původu replikace SV40, což vede k produkci částic podobných virům (VLP).

VLP, zbavené virového genetického materiálu, jsou klíčové pro vytvoření základu subjednotkových vakcín a vakcín založených na VLP. Produkci rekombinantních proteinů v buňkách 293T usnadňují různé transfekční metody s důrazem na tvorbu fúzních proteinů AP a dalších typů proteinů, které tvoří antigenní složku vakcín.

Schopnosti genomového inženýrství buněčné linie 293T umožňují přizpůsobení expresních konstruktů, což dále zvyšuje produkci virových vektorů. To spolu se schopností produkovat proteiny v suspenzní kultuře nebo v adherentních podmínkách činí z buněčné linie 293T komplexní řešení pro moderní vývoj vakcín.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení