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HEK293T細胞
ティッシュ
腎臓
同義語
Hek293T, HEK-293T, HEK 293T, HEK-293-T, HEK 293 T, 293-T, 293 T, 293T, Human Embryonic Kidney 293T, 293tsA1609neo

HEK293T細胞

Cell line · 製品番号 300189

親株であるHEK 293細胞のトランスフェクション効率に優れた派生株であるHEK 293Tは、バイオテクノロジー分野において、……のための汎用性が高く強力なツールとして際立っています。

€430.00税・送料別

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01概要

説明

HEK293T細胞は、親細胞であるHEK293細胞の高度にトランスフェクション可能な誘導体であり、組換えタンパク質や様々なタイプのワクチンの生産のための、バイオテクノロジーの分野における多用途で強力なツールとして際立っている。

HEK-293T細胞は、胚性腎臓293細胞にSV40ラージT抗原をコードするプラスミドをトランスフェクトすることによって作製された。オリジナルのHEK293細胞株は、ヒト胚性腎臓組織の上皮細胞から開発されたもので、その形質転換は、研究者らによって行われた293回目の実験で行われた。

ワクチン開発の領域では、293T胚性腎臓細胞はアデノウイルスベクターを含むウイルスベクター生産に極めて重要である。HEK293T細胞は、特定の培養条件下で、SV40複製起点を含むアデノウイルスやレトロウイルスのエレメントを持つベクターでトランスフェクトされ、ウイルス様粒子(VLP)が産生される。

ウイルスの遺伝物質を含まないVLPは、サブユニットやVLPベースのワクチンの基礎となる重要なものである。293T細胞における組換えタンパク質の生産は、ワクチンの抗原成分を形成するAP融合タンパク質やその他のタンパク質タイプの生成に重点を置き、様々なトランスフェクション法によって促進される。

293T細胞株のゲノム工学的能力は、発現構築物のカスタマイズを可能にし、ウイルスベクターの生産をさらに後押しする。これは、浮遊培養または接着条件下でタンパク質を生産する能力と相まって、293T細胞株を最新のワクチン開発のためのフルスタック・ソリューションにしている。

ティッシュ
腎臓
用途
ワクチン開発
同義語
  • Hek293T
  • HEK-293T
  • HEK 293T
  • HEK-293-T
  • HEK 293 T
  • 293-T
  • 293 T
  • 293T
  • Human Embryonic Kidney 293T
  • 293tsA1609neo

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This HEK293T cell line contains SV40, supporting high-level expression of transfected plasmids and efficient viral packaging. The construct is integrated into human embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
腫瘍形成性
ヌードマウス
倍増時間
30時間

04識別子

引用
HEK293T (Cytion カタログ番号 300189)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0063

05発現と感受性

発現している受容体
ビトロネクチン
タンパク質の発現
CEA陰性、p53陽性

06取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
10⁴細胞/cm²の密度で播種した場合、約4日で密接層が形成される
流体の更新
週2回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
胎児