HEK293T-cellen

HEK-293T, een sterk transfecteerbare afgeleide van de oudercel HEK-293, is een veelzijdig en krachtig hulpmiddel in de biotechnologie voor de productie van recombinante eiwitten en verschillende soorten vaccins.

HEK-293T cellen werden gegenereerd door embryonale nier 293 cellen te transfecteren met een plasmide dat codeert voor het SV40 groot T-antigeen. De oorspronkelijke HEK293 cellijn werd ontwikkeld uit de epitheelcellen van menselijk embryonaal nierweefsel, waarbij de transformatie plaatsvond in wat met name het 293e experiment was dat door de onderzoekers werd uitgevoerd.

Op het gebied van de ontwikkeling van vaccins zijn de 293T embryonale niercellen cruciaal voor de productie van virale vectoren, waaronder adenovirusvectoren. HEK293T-cellen worden onder specifieke kweekomstandigheden getransfecteerd met vectoren die adenovirale en retrovirale elementen bevatten, waaronder de SV40-replicatieoorsprong, wat leidt tot de productie van virusachtige deeltjes (VLP's).

De VLP's, zonder viraal genetisch materiaal, vormen de basis voor subunit- en VLP-vaccins. De recombinante eiwitproductie in 293T cellen wordt vergemakkelijkt door verschillende transfectiemethoden, waarbij de nadruk ligt op het genereren van AP fusie-eiwitten en andere soorten eiwitten die de antigene component van vaccins vormen.

De mogelijkheden voor genoom-engineering van de 293T-cellijn maken het mogelijk om expressieconstructen op maat te maken, waardoor de productie van virale vectoren verder wordt gestimuleerd. Dit, in combinatie met de mogelijkheid om eiwitten te produceren in suspensiecultuur of adherente omstandigheden, maakt de 293T cellijn een full-stack oplossing voor moderne vaccinontwikkeling.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring