HEK293T Hücreleri

Ebeveyn HEK 293 hücresinin yüksek oranda transfekte edilebilir bir türevi olan HEK 293T, rekombinant proteinlerin ve çeşitli aşı türlerinin üretimi için biyoteknoloji alanında çok yönlü ve güçlü bir araç olarak öne çıkmaktadır.

HEK-293T hücreleri, embriyonik böbrek 293 hücrelerinin SV40 büyük T antijenini kodlayan bir plazmid ile transfekte edilmesiyle üretilmiştir. Orijinal HEK293 hücre hattı, insan embriyonik böbrek dokusunun epitel hücrelerinden geliştirildi ve dönüşümü, araştırmacılar tarafından gerçekleştirilen 293. deneyde meydana geldi.

Aşı geliştirme alanında, 293T embriyonik böbrek hücreleri, adenovirüs vektörleri de dahil olmak üzere viral vektör üretimi için çok önemlidir. HEK293T hücreleri, belirli kültür koşulları altında, SV40 replikasyon kökeni de dahil olmak üzere adenoviral ve retroviral unsurlar taşıyan vektörlerle transfekte edilerek virüs benzeri partiküllerin (VLP'ler) üretimine yol açar.

Viral genetik materyalden yoksun olan VLP'ler, alt birim ve VLP tabanlı aşıların temelini oluşturmada kilit öneme sahiptir. 293T hücrelerinde rekombinant protein üretimi, AP füzyon proteinlerinin ve aşıların antijenik bileşenini oluşturan diğer protein türlerinin üretilmesine vurgu yapılarak çeşitli transfeksiyon yöntemleriyle kolaylaştırılır.

293T hücre hattının genom mühendisliği yetenekleri, ekspresyon yapılarının özelleştirilmesine olanak tanıyarak viral vektörlerin üretimini daha da artırmaktadır. Bu özellik, süspansiyon kültüründe veya yapışık koşullarda protein üretme kabiliyetiyle birleştiğinde, 293T hücre hattını modern aşı geliştirme için eksiksiz bir çözüm haline getirmektedir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın