HEK293T sejtek

A HEK 293T, a HEK 293 szülősejt nagymértékben transzfektálható származéka, sokoldalú és hatékony eszköz a biotechnológia területén a rekombináns fehérjék és különböző típusú vakcinák előállítására.

A HEK-293T sejteket úgy hozták létre, hogy a 293-as embrionális vesesejteket transzfektálták az SV40 nagy T antigént kódoló plazmiddal. Az eredeti HEK293 sejtvonalat emberi embrionális veseszövet hámsejtjeiből fejlesztették ki, és az átalakítás a kutatók által végzett 293. kísérlet során történt.

A vakcinafejlesztés területén a 293T embrionális vesesejtek kulcsfontosságúak a vírusvektorok, köztük az adenovírus vektorok előállításában. A HEK293T sejteket speciális tenyésztési körülmények között adenovírus és retrovírus elemeket hordozó vektorokkal transzfektálják, beleértve az SV40 replikációs eredetét is, ami vírusszerű részecskék (VLP-k) előállításához vezet.

A vírus genetikai anyagától mentes VLP-k kulcsfontosságúak az alegység- és VLP-alapú vakcinák alapjául. A 293T sejtekben történő rekombináns fehérje előállítását különböző transzfekciós módszerek segítik elő, hangsúlyt fektetve az AP fúziós fehérjék és más fehérjetípusok előállítására, amelyek a vakcinák antigén komponensét alkotják.

A 293T sejtvonal genommérnöki képességei lehetővé teszik az expressziós konstrukciók testre szabását, ami tovább fokozza a vírusvektorok előállítását. Ez, valamint a fehérjék szuszpenziós kultúrában vagy adherens körülmények között történő előállításának képessége a 293T sejtvonalat a modern vakcinafejlesztés teljes körű megoldásává teszi.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban