Tartalomra ugrás
HEK293 suspension-adapted
Szövet
Vese

Dokumentumok

HEK293 suspension-adapted

Cell line · Termékszám 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

A HEK293 szuszpenziós adaptált sejtvonal a 293-as humán embrionális vesesejtek (HEK293) egy olyan változata, amelyet úgy módosítottunk, hogy adhezív kultúra helyett szuszpenziós kultúrában növekedjen. Ez az adaptáció jelentős az olyan ipari alkalmazásokban, ahol nagy mennyiségű fehérje előállítására van szükség. A sejtek megtartják az eredeti HEK293 vonal számos jellemzőjét, beleértve a robusztus tranziens transzfekciós hatékonyságot és a kifejezett fehérjék poszt-transzlációs módosításának képességét a natív emberi sejtekhez hasonló módon.

Ezeket a sejteket különösen nagyra értékelik a biotechnológiai és gyógyszeriparban a génterápiához és vakcinafejlesztéshez szükséges rekombináns fehérjék és vírusok előállítása céljából. A szuszpenziós tenyésztéshez való alkalmazkodás lehetővé teszi a könnyebb skálázhatóságot és egyszerűsíti a betakarítási folyamatot, így alkalmasabbá teszi a kereskedelmi méretű biológiai feldolgozásra. A HEK293 szuszpenzióhoz adaptált sejtvonal támogatja a különböző vírusgyártó rendszereket, beleértve az adenovírust, a lentivírust és az adeno-asszociált vírust (AAV), amelyek kulcsfontosságúak a terápiás alkalmazásokban és a kutatásban.

Összességében a HEK293 szuszpenzióval adaptált sejtvonal kulcsfontosságú eszköz a molekuláris biológia és a biofeldolgozás területén, mivel sokoldalú platformot biztosít különböző biológiailag aktív molekulák előállításához. Könnyű genetikai manipulálhatósága és az emberi sejtmintáknak megfelelően helyesen összehajtogatott és poszttranszlációsan módosított fehérjék előállítására való képessége számos fejlett terápiás és kutatási környezetben nélkülözhetetlen erőforrássá teszi.

Szövet
Vese
Alkalmazások
Transzfekciós gazdatest

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Kerek
Daganatképző
Meztelen egerekben

04Azonosítók

Hivatkozás
HEK293 szuszpenzióval adaptált (Cytion katalógusszám: 300686)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Vitronectin
Fehérjeexpresszió
CEA negatív, p53 pozitív
Vírusérzékenység
Adenovírus 5 DNS-sel átalakítva adenovírus 5 DNS-sel

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Panserin 293S (PanBiotech, Németország)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
Nincs szükség kiegészítőkre
Diszociációs reagens
Nem szükséges
Átültetés
Tartsa a szuszpenziós sejteket 5 x 105 és 2-3 x 106 sejt/ml közötti sejtsűrűségben Eppendorf sejtkultúra-lombikokban, rázógépen, 37 °C/5% CO2-tartalmú inkubátorban. A sejtsűrűség elérése után 2-3 x 106 sejt/ml, végezzen szubkultúrát. Óvatosan távolítsa el a sejteket, hogy ne alakuljanak ki csomók. Miután a sejtsűrűség elérte az 1-2 x 106 sejt/ml értéket, centrifugálással gyűjtsük össze a sejteket 200xg-vel 5 percig, és a felülúszót dobjuk ki. Hígítsuk megfelelő mennyiségű friss, előmelegített tenyésztőközeggel, és számoljuk meg a sejteket, hogy információt kapjunk a sejtek életképességéről és számáról. Gyűjtse össze a sejteket 200xg-os centrifugálással 5 percig, és dobja ki a felülúszót. Szuszpendálja újra a sejteket megfelelő mennyiségű fagyasztó táptalajban, és számolja meg őket még egyszer. A sejtek életképességének >>80%nak kell lennie, a sejtsűrűségnek 5-10 millió sejt/ml-nek kell lennie. Pipettázza a sejteket előre címkézett kriovialákba. Használjon CoolCell fagyasztóedényt vagy szabályozott sebességű fagyasztót, hogy biztosítsa a 1°C/perc hűtési sebességet.
Ültetési sűrűség
5 x 105 sejt/ml
Az olvadás utáni helyreállás
Kezdje el a tenyésztést 5 x 105 sejt/ml sűrűséggel, és tartsa a sejtkoncentrációt 2-3 x 106 sejt/ml szinten az optimális növekedés érdekében. Inkubálja 37 °C-on/5% CO2-koncentráció mellett, 100-150 rpm sebességű sejtrázógépen.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Magzat