Siirry sisältöön
HEK293 suspension-adapted
Kudos
Munuaiset

Asiakirjat

HEK293 suspension-adapted

Cell line · Tuotenumero 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HEK293-suspensiosolulinja on ihmisen alkiomunuaisen 293-solujen (HEK293) muunnos, joka on muunnettu kasvamaan suspensioviljelyssä adheesioviljelyn sijasta. Tämä mukautus on merkittävä teollisissa sovelluksissa, joissa tarvitaan laajamittaista proteiinituotantoa. Solut säilyttävät monet alkuperäisen HEK293-linjan ominaisuuksista, kuten vankan transfektiotehokkuuden ja kyvyn muuttaa ekspressoituja proteiineja translaation jälkeen samalla tavalla kuin natiivit ihmissolut.

Näitä soluja arvostetaan erityisesti bioteknologia- ja lääketeollisuudessa rekombinanttiproteiinien ja -virusten tuottamiseen geeniterapiaa ja rokotekehitystä varten. Suspensioviljelyyn sopeutuminen mahdollistaa helpomman skaalautuvuuden ja yksinkertaistaa sadonkorjuuprosessia, jolloin se soveltuu paremmin kaupallisen mittakaavan bioprosessointiin. HEK293-suspensioviljelyyn mukautettu solulinja tukee erilaisia virustuotantojärjestelmiä, kuten adenovirusta, lentivirusta ja adeno-assosioitunutta virusta (AAV), jotka ovat keskeisiä terapeuttisissa sovelluksissa ja tutkimuksessa.

Kaiken kaikkiaan HEK293-suspensio-adaptiosolulinja on tärkeä väline molekyylibiologian ja bioprosessoinnin alalla, sillä se tarjoaa monipuolisen alustan erilaisten biologisesti aktiivisten molekyylien tuottamiseen. Sen helppous geneettisessä manipuloinnissa ja kyky tuottaa proteiineja, jotka ovat oikein taitettuja ja translaation jälkeen muunnettuja ihmisen solumallien mukaisesti, tekevät siitä korvaamattoman resurssin monissa kehittyneissä terapeuttisissa ja tutkimusasetuksissa.

Kudos
Munuaiset
Sovellukset
Transfektion isäntä

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Jousitus
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Pyöreä
Kasvaimia aiheuttava
Alastomilla hiirillä

04Tunnisteet

Lähdeviite
HEK293 suspensio-adaptioitu (Cytionin luettelonumero 300686)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Vitronektiini
Proteiinin ilmentyminen
CEA negatiivinen, p53 positiivinen
Viruksille altistuminen
Muunnettu adenovirus 5 DNA:lla adenovirus 5 DNA:lla

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Panserin 293S (PanBiotech, Saksa)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisäravinteita ei tarvita
Dissosiaatioreagenssi
Ei vaadita
Soluviljely
Säilytä suspensiosolut solutiheyksillä 5 x 105 ja 2-3 x 106 solua/ml Eppendorf-soluviljelypulloissa ravistimella inkubaattorissa 37 °C:ssa/5 % CO2:ssa. Tee aliviljely, kun solutiheys on saavuttanut 2-3 x 106 solua/ml. Irrota solut varovasti, jotta ne eivät muodosta klustereita. Kun solutiheys on 1–2 x 106 solua/ml, kerää solut sentrifugoimalla 200 x g:n nopeudella 5 minuutin ajan ja hävitä supernatantti. Laimenna sopivalla määrällä tuoretta, esilämmitettyä viljelyainetta ja laske solut, jotta saat tietoa solujen elinkelpoisuudesta ja lukumäärästä. Kerää solut sentrifugoimalla 200 x g:n nopeudella 5 minuutin ajan ja hävitä supernatantti. Suspendoi solut uudelleen sopivaan määrään pakastusväliainetta ja laske ne uudelleen. Solujen elinkykyisyyden tulisi olla >>80 %, suositeltava solutiheys on 5–10 miljoonaa solua/ml. Pipetoi solut valmiiksi merkittyihin kryoputkiin. Käytä joko CoolCell-jäädytysastiaa tai kontrolloitua pakastinta, jotta jäähdytysnopeus on 1 °C/min.
Kylvötiheys
5 x 105 solua/ml
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Aloita viljely tiheydellä 5 x 105 solua/ml ja pidä solupitoisuus 2–3 x 106 solua/ml optimaalisen kasvun saavuttamiseksi. Inkuboi 37 °C:ssa/5 % CO2:ssa soluravistimella 100–150 rpm:n nopeudella.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Sikiö