Siirry sisältöön
HEK293A
Kudos
Alkion munuainen
Synonyymit
HEK-293A, HEK293A, HEK 293A, HEK293-A, QBI-HEK 293A, QBI-293A

Asiakirjat

HEK293A

Cell line · Tuotenumero 305070

HEK293A-solulinja, joka on johdettu ihmisen alkion munuaisista peräisin olevista 293-soluista (HEK293), on erikoistunut työkalu virologisessa ja geeniterapiatutkimuksessa...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HEK293A-solulinja, joka on ihmisen alkiomunuaisen 293-solujen (HEK293) johdannainen, on erikoistunut väline virologisessa ja geeniterapiatutkimuksessa, erityisesti replikaatiokyvyttömien adenovirusten tuottamisessa, monistamisessa ja titraamisessa. Näillä soluilla on litteä morfologia, mikä helpottaa merkittävästi mikroskooppista tutkimusta ja titrausprosesseja ja helpottaa viruspartikkelien laskemista ja arviointia.

HEK293A-solulinjan keskeinen ominaisuus on adenoviruksen E1-geenin vakaa integroituminen sen genomiin. Tämä integroituminen on ratkaisevan tärkeää, koska se tarjoaa tarvittavan transkriptiokoneiston E1-proteiinien, erityisesti E1a:n ja E1b:n, ilmentymiselle. Näiden proteiinien läsnäolo on välttämätöntä adenovirusvektoreiden replikaatiolle solussa. E1a-proteiini toimii ensisijaisesti adenoviruksen genomin transkription aktivoimiseksi, kun taas E1b-proteiinit osallistuvat viruksen replikaatioon ja solusyklin häiriöihin.

HEK293A-solujen hyöty ulottuu laajemmalle kuin pelkkä virusten replikaation tukeminen. Nämä solut helpottavat korkealaatuisten ja korkean titterin virusvalmisteiden tehokasta tuotantoa, joka on välttämätöntä sekä perustutkimuksessa että terapeuttisissa sovelluksissa. Solulinjan vankka replikaatiokapasiteetti ja helppokäyttöisyys mahdollistavat sen, että tutkijat voivat seuloa ja kehittää adenoviruskonstruktioita ennennäkemättömän tarkasti ja tehokkaasti.

Yhteenvetona voidaan todeta, että HEK293A-solulinja on välttämätön resurssi virologian ja geeniterapian alalla. Sen kyky ilmentää vakaasti E1-proteiineja ja tukea adenovirusten replikaatiota tekee siitä arvokkaan työkalun tutkijoille, jotka haluavat tuottaa ja manipuloida adenovirusvektoreita. Solulinjan ominaisuudet mahdollistavat virusvektoreiden tehokkaan tuottamisen, mikä on ratkaisevan tärkeää tutkimuksen ja mahdollisten terapeuttisten toimenpiteiden edistämiseksi.

Kudos
Alkion munuainen
Synonyymit
  • HEK-293A
  • HEK293A
  • HEK 293A
  • HEK293-A
  • QBI-HEK 293A
  • QBI-293A

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This HEK293A cell line contains SV40 from Simian Virus 40, supporting enhanced transfection performance and proliferation. The construct is stably integrated into embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
HEK293A (Cytionin luettelonumero 305070)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_6910

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Sikiö