Gå direkte til indholdet
HEK293A
Væv
Embryonal nyre
Synonymer
HEK-293A, HEK293A, HEK 293A, HEK293-A, QBI-HEK 293A, QBI-293A

Dokumenter

HEK293A

Cell line · Varenummer 305070

HEK293A-cellelinjen, der stammer fra de humane embryonale nyreceller 293 (HEK293), udgør et specialiseret redskab inden for virologisk forskning og genterapiforskning...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HEK293A-cellelinjen, som er et derivat af de humane embryonale 293-celler (HEK293), er et specialiseret værktøj inden for virologisk og genterapeutisk forskning, især inden for produktion, amplifikation og titrering af replikationsinkompetente adenovirus. Disse celler har en flad morfologi, som er en stor hjælp ved mikroskopiske undersøgelser og titreringsprocesser, hvilket gør det nemmere at tælle og vurdere viruspartikler.

Et centralt træk ved HEK293A-cellelinjen er den stabile integration af adenovirus E1-genet i dens genom. Denne integration er kritisk, da den giver det nødvendige transkriptionsmaskineri til ekspression af E1-proteiner, især E1a og E1b. Tilstedeværelsen af disse proteiner er afgørende for replikationen af adenovirale vektorer i cellen. E1a-proteinet fungerer primært til at aktivere transkription af adenovirusgenomet, mens E1b-proteiner er involveret i viral replikation og forstyrrelse af cellecyklus.

Brugen af HEK293A-celler strækker sig ud over blot at understøtte viral replikation. Disse celler muliggør en effektiv produktion af viruspræparater med høj titer og høj kvalitet, som er afgørende for både grundforskning og terapeutiske anvendelser. Cellelinjens robuste replikationskapacitet og lette håndtering gør det muligt for forskere at screene og udvikle adenovirale konstruktioner med hidtil uset præcision og effektivitet.

Kort sagt er HEK293A-cellelinjen en uundværlig ressource inden for virologi og genterapi. Dens evne til stabilt at udtrykke E1-proteiner og understøtte adenoviral replikation gør den til et værdifuldt værktøj for forskere, der ønsker at producere og manipulere adenovirale vektorer. Cellelinjens egenskaber muliggør en effektiv generering af virale vektorer, hvilket er afgørende for at fremme forskning og potentielle terapeutiske indgreb.

Væv
Embryonal nyre
Synonymer
  • HEK-293A
  • HEK293A
  • HEK 293A
  • HEK293-A
  • QBI-HEK 293A
  • QBI-293A

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This HEK293A cell line contains SV40 from Simian Virus 40, supporting enhanced transfection performance and proliferation. The construct is stably integrated into embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HEK293A (Cytion katalognummer 305070)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6910

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
Foster