Tartalomra ugrás
HEK293A
Szövet
Embrionális vese
Szinonimák
HEK-293A, HEK293A, HEK 293A, HEK293-A, QBI-HEK 293A, QBI-293A

Dokumentumok

HEK293A

Cell line · Termékszám 305070

A HEK293A sejtvonal, amely az emberi embrionális vese 293 (HEK293) sejtekből származik, a virológiai és génterápiás kutatások egyik speciális eszközét jelenti...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HEK293A sejtvonal, amely a humán embrionális vese 293 (HEK293) sejtek származéka, speciális eszközt jelent a virológiai és génterápiás kutatásokban, különösen a replikáció-inkompetens adenovírusok előállításában, amplifikálásában és titrálásában. Ezek a sejtek lapos morfológiával rendelkeznek, ami jelentősen megkönnyíti a mikroszkópos vizsgálatot és a titrálási folyamatokat, és egyszerűbbé teszi a vírusrészecskék megszámlálását és értékelését.

A HEK293A sejtvonal kulcsfontosságú jellemzője az adenovírus E1 génjének stabil integrálása a genomjába. Ez az integráció kritikus jelentőségű, mivel biztosítja az E1 fehérjék, különösen az E1a és E1b expressziójához szükséges transzkripciós gépezetet. E fehérjék jelenléte elengedhetetlen az adenovírus vektorok sejtben történő replikációjához. Az E1a fehérje elsősorban az adenovírus genom transzkripciójának aktiválásában működik, míg az E1b fehérjék a vírus replikációjában és a sejtciklus megszakításában vesznek részt.

A HEK293A sejtek hasznossága túlmutat a vírusreplikáció puszta támogatásán. Ezek a sejtek megkönnyítik a magas titerű, jó minőségű víruspreparátumok hatékony előállítását, amelyek mind az alapkutatáshoz, mind a terápiás alkalmazásokhoz nélkülözhetetlenek. A sejtvonal robusztus replikációs kapacitása és könnyű kezelhetősége lehetővé teszi a kutatók számára, hogy adenovirális konstrukciókat szűrjenek és fejlesszenek ki példátlan pontossággal és hatékonysággal.

Összefoglalva, a HEK293A sejtvonal nélkülözhetetlen erőforrás a virológia és a génterápia területén. Az E1 fehérjék stabil expressziójára és az adenovirális replikáció támogatására való képessége értékes eszközzé teszi az adenovirális vektorok előállítását és manipulálását célzó kutatók számára. A sejtvonal jellemzői lehetővé teszik a vírusvektorok hatékony előállítását, ami kulcsfontosságú a kutatás és a lehetséges terápiás beavatkozások előmozdítása szempontjából.

Szövet
Embrionális vese
Szinonimák
  • HEK-293A
  • HEK293A
  • HEK 293A
  • HEK293-A
  • QBI-HEK 293A
  • QBI-293A

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This HEK293A cell line contains SV40 from Simian Virus 40, supporting enhanced transfection performance and proliferation. The construct is stably integrated into embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis

04Azonosítók

Hivatkozás
HEK293A (Cytion katalógusszám 305070)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_6910

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
Magzat