HEK293A

A linha celular HEK293A, um derivado das células 293 do rim embrionário humano (HEK293), representa uma ferramenta especializada na investigação virológica e de terapia génica, particularmente na produção, amplificação e titulação de adenovírus incompetentes para a replicação. Estas células apresentam uma morfologia plana, o que facilita significativamente o exame microscópico e os processos de titulação, tornando mais simples a contagem e a avaliação das partículas virais.

Uma caraterística fundamental da linha celular HEK293A é a integração estável do gene E1 do adenovírus no seu genoma. Esta integração é fundamental, uma vez que fornece a maquinaria transcricional necessária para a expressão das proteínas E1, especificamente E1a e E1b. A presença destas proteínas é essencial para a replicação dos vectores adenovirais na célula. A proteína E1a funciona principalmente para ativar a transcrição do genoma do adenovírus, enquanto as proteínas E1b estão envolvidas na replicação viral e na interrupção do ciclo celular.

A utilidade das células HEK293A vai para além do mero suporte da replicação viral. Estas células facilitam a produção eficiente de preparações virais de alto título e de alta qualidade, essenciais tanto para a investigação fundamental como para as aplicações terapêuticas. A capacidade de replicação robusta da linha celular e a facilidade de manuseamento permitem aos investigadores selecionar e desenvolver construções adenovirais com uma precisão e eficiência sem precedentes.

Em resumo, a linha celular HEK293A é um recurso indispensável no domínio da virologia e da terapia genética. A sua capacidade de expressar de forma estável as proteínas E1 e de suportar a replicação adenoviral torna-a uma ferramenta valiosa para os investigadores que procuram produzir e manipular vectores adenovirais. As caraterísticas da linha celular permitem a geração eficiente de vectores virais, cruciais para o avanço da investigação e para potenciais intervenções terapêuticas.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia