Preskoči na vsebino
HEK293A
Tkivo
Embrionalna ledvica
Sinonimi
HEK-293A, HEK293A, HEK 293A, HEK293-A, QBI-HEK 293A, QBI-293A

Dokumenti

HEK293A

Cell line · Številka izdelka 305070

Celična linija HEK293A, ki izhaja iz človeških embrionalnih ledvičnih celic 293 (HEK293), predstavlja specializirano orodje v raziskavah na področju virologije in genske terapije...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija HEK293A, ki je izpeljanka celic človeške embrionalne ledvice 293 (HEK293), je specializirano orodje v viroloških raziskavah in raziskavah genskega zdravljenja, zlasti pri proizvodnji, pomnoževanju in titraciji adenovirusov, ki niso sposobni replikacije. Te celice imajo ravno morfologijo, kar bistveno olajša mikroskopsko pregledovanje in titracijo ter poenostavi štetje in ocenjevanje virusnih delcev.

Ključna značilnost celične linije HEK293A je stabilna integracija gena E1 adenovirusa v njen genom. Ta integracija je ključnega pomena, saj zagotavlja potrebne transkripcijske mehanizme za izražanje beljakovin E1, zlasti E1a in E1b. Prisotnost teh beljakovin je bistvena za razmnoževanje adenovirusnih vektorjev v celici. Beljakovina E1a predvsem aktivira transkripcijo adenovirusnega genoma, medtem ko so beljakovine E1b vključene v virusno replikacijo in prekinitev celičnega cikla.

Uporabnost celic HEK293A presega zgolj podporo virusni replikaciji. Te celice omogočajo učinkovito proizvodnjo visoko titrskih, visokokakovostnih virusnih pripravkov, ki so bistveni za temeljne raziskave in terapevtske aplikacije. Robustna sposobnost replikacije celične linije in enostavnost rokovanja omogočata raziskovalcem, da pregledajo in razvijejo adenovirusne konstrukcije z natančnostjo in učinkovitostjo brez primere.

Če povzamemo, je celična linija HEK293A nepogrešljiv vir na področju virologije in genskega zdravljenja. Zaradi svoje sposobnosti stabilnega izražanja beljakovin E1 in podpore adenovirusni replikaciji je dragoceno orodje za raziskovalce, ki želijo proizvajati adenovirusne vektorje in z njimi manipulirati. Lastnosti celične linije omogočajo učinkovito proizvodnjo virusnih vektorjev, kar je ključnega pomena za napredovanje raziskav in morebitnih terapevtskih posegov.

Tkivo
Embrionalna ledvica
Sinonimi
  • HEK-293A
  • HEK293A
  • HEK 293A
  • HEK293-A
  • QBI-HEK 293A
  • QBI-293A

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This HEK293A cell line contains SV40 from Simian Virus 40, supporting enhanced transfection performance and proliferation. The construct is stably integrated into embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski

04Identifikatorji

Navajanje vira
HEK293A (kataloška številka Cytion 305070)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6910

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
Plod