Preskoči na vsebino
Celice HEK293 EBNA
Tkivo
Embrionalna ledvica
Sinonimi
HEK293-EBNA, 293 c18, 293c18, HEK 293 c18, HEK-293 c18, HEK293-EBNA1, HEK-293-EBNA, HEK 293-EBNA, HEK 293 EBNA, HEK293EBNA, 293 EBNA, 293-EBNA1, 293-EBNA, 293/EBNA, 293EBNA, EBNA-293, EBNA293, HEK293E, HEK/EBNA, HEK-EBNA, HEK.EBNA, 293/EBNA-1, 298E

Dokumenti

Celice HEK293 EBNA

Cell line · Številka izdelka 300264

Celična linija HEK293 EBNA je izpeljanka izvirne linije HEK293, ki je bila sama pridobljena iz človeških embrionalnih ledvičnih celic, gojenih v tkivni kulturi....

€650.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija HEK293 EBNA je izpeljanka prvotne linije HEK293, ki je bila pridobljena iz celic človeških embrionalnih ledvic, gojenih v tkivni kulturi. Ta posebna podlinija je bila zasnovana tako, da stabilno izraža jedrni antigen-1 virusa Epstein-Barr (EBNA-1). Izražanje EBNA-1 omogoča epizomalno replikacijo plazmidov, ki nosijo izvor replikacije EBV, zaradi česar so celice HEK293 EBNA še posebej dragocene za proizvodnjo rekombinantnih beljakovin in študije izražanja genov, ki vključujejo epizomalne vektorje.

Celice HEK293 EBNA ohranijo številne značilnosti matičnih celic HEK293, vključno z njihovo oprijemljivostjo na plastične celične kulture in robustno rastjo v standardnih medijih za celične kulture sesalcev. Dodatek EBNA-1 povečuje njihovo uporabnost v raziskavah in biotehnoloških aplikacijah, saj povečuje sposobnost celic za razmnoževanje plazmidov z izvorom replikacije plazmidov EBV. Ta lastnost je ključna za proizvodnjo stabilnih in visoko donosnih rekombinantnih beljakovin, kar je bistveno tako za raziskovalne namene kot za industrijsko proizvodnjo.

Tkivo
Embrionalna ledvica
Sinonimi
  • HEK293-EBNA
  • 293 c18
  • 293c18
  • HEK 293 c18
  • HEK-293 c18
  • HEK293-EBNA1
  • HEK-293-EBNA
  • HEK 293-EBNA
  • HEK 293 EBNA
  • HEK293EBNA
  • 293 EBNA
  • 293-EBNA1
  • 293-EBNA
  • 293/EBNA
  • 293EBNA
  • EBNA-293
  • EBNA293
  • HEK293E
  • HEK/EBNA
  • HEK-EBNA
  • HEK.EBNA
  • 293/EBNA-1
  • 298E

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This HEK293 EBNA cell line contains EBV nuclear antigen (EBNA) sequences enabling episomal replication of EBV-derived plasmids, without releasing infectious virus particles. The modification is stably present in embryonic kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski

04Identifikatorji

Navajanje vira
HEK293 EBNA (kataloška številka Cytion 300264)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6974

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
EBNA1
Virusi
Adenovirus 5 (transformant), EBV (izraža EBNA1)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Plod