Células HEK293 EBNA

La línea celular HEK293 EBNA es un derivado de la línea original HEK293, derivada a su vez de células de riñón embrionario humano cultivadas en tejidos. Esta sublínea concreta se diseñó para expresar de forma estable el antígeno nuclear-1 del virus de Epstein-Barr (EBNA-1). La expresión de EBNA-1 permite la replicación episomal de plásmidos que llevan el origen de replicación del VEB, lo que hace que las células HEK293 EBNA sean especialmente valiosas para la producción de proteínas recombinantes y para estudios de expresión génica con vectores episomales.

Las células HEK293 EBNA conservan muchas de las características de las células HEK293 progenitoras, incluida su adherencia al plástico de cultivo celular y su crecimiento robusto en medios estándar de cultivo celular de mamíferos. La adición de EBNA-1 amplía su utilidad en aplicaciones biotecnológicas y de investigación, ya que mejora la capacidad de las células para propagar plásmidos con el origen EBV de replicación de plásmidos. Esta característica es fundamental para producir proteínas recombinantes estables y de alto rendimiento, lo que resulta esencial tanto para fines de investigación como para la producción a escala industrial.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía