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HEK293T/17
Pañuelo de papel
Riñón embrionario
Sinónimos
HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17

Documentos

HEK293T/17

Cell line · Número de producto 305117

The 293T/17 cell line is an immortalized variant of the HEK293 line, derived from human embryonic kidney cells and extensively utilized in research, parti...

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01Información general

Descripción

La línea celular 293T/17 es una variante inmortalizada de la línea HEK293, derivada de células de riñón embrionario humano y ampliamente utilizada en investigación, particularmente en el estudio y producción de vectores retrovirales y lentivirales. Esta línea celular ha sido modificada para expresar el antígeno SV40 large T, aumentando su utilidad en la producción de vectores virales. La expresión del antígeno SV40 gran T es una característica clave que permite a estas células replicar plásmidos que contienen el origen de replicación SV40, aumentando significativamente el rendimiento de ADN plasmídico en procedimientos de transfección transitoria. Esta característica es especialmente beneficiosa para la producción de vectores virales.

las células 293T/17 son esenciales en la producción de vectores virales como retrovirus y lentivirus. Producen partículas virales de forma eficiente gracias a su capacidad para amplificar plásmidos transfectados y favorecer el ensamblaje y la liberación viral. Esto las convierte en una herramienta vital en la investigación sobre terapia génica, donde estos vectores se utilizan para introducir material genético en las células huésped. Las células presentan una elevada eficacia de transfección, crucial para la introducción y expresión satisfactorias de ADN extraño durante la construcción de vectores. Esta alta eficiencia permite estudiar la función génica y generar proteínas recombinantes de forma eficaz.

Las sólidas capacidades de la línea celular 293T/17 la hacen inestimable tanto para la investigación científica básica como para aplicaciones terapéuticas. Se utiliza ampliamente en biología molecular e ingeniería genética para la expresión de proteínas, el análisis de la función génica y el desarrollo de nuevas terapias génicas. La eficacia de la línea celular en la producción de vectores virales facilita los experimentos que requieren el suministro de material genético, lo que la convierte en una piedra angular en el campo de la virología. La línea celular 293T/17 sigue desempeñando un papel fundamental en el avance de nuestra comprensión de la función génica y el desarrollo de intervenciones terapéuticas.

Pañuelo de papel
Riñón embrionario
Aplicaciones
Esta línea celular es una opción óptima para la transfección, el cribado de alto rendimiento, la toxicología y el desarrollo de vacunas.
Sinónimos
  • HEK293T/17
  • HEK-293T/17
  • HEK 293T/17

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This HEK293T/17 cell line contains SV40, enhancing plasmid replication and packaging efficiency. The insert is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial

04Identificadores

Referencia
HEK293T/17 (número de catálogo 305117 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1926

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
Antígeno SV40 T
Virus
SV40 (expresa el antígeno SV40 T)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Feto