Siirry sisältöön
HEK293T/17
Kudos
Alkion munuainen
Synonyymit
HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17

Asiakirjat

HEK293T/17

Cell line · Tuotenumero 305117

The 293T/17 cell line is an immortalized variant of the HEK293 line, derived from human embryonic kidney cells and extensively utilized in research, parti...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

293T/17-solulinja on ihmisen alkion munuaissoluista peräisin olevan HEK293-solulinjan kuolematon muunnos, jota käytetään laajasti tutkimuksessa, erityisesti retrovirus- ja lentiviraalivektoreiden tutkimuksessa ja tuotannossa. Tämä solulinja on muunnettu ilmentämään SV40 large T -antigeenia, mikä lisää sen käyttökelpoisuutta virusvektorien tuotannossa. SV40 large T -antigeenin ilmentyminen on keskeinen ominaisuus, jonka ansiosta nämä solut pystyvät replikoimaan plasmideja, jotka sisältävät SV40-replikaatioalkuperän, mikä lisää merkittävästi plasmidi-DNA:n saantoa ohimenevissä transfektiomenetelmissä. Tämä ominaisuus on erityisen hyödyllinen virusvektoreiden tuotannossa.

293T/17-solut ovat välttämättömiä virusvektoreiden, kuten retrovirusten ja lentivirusten, tuotannossa. Ne tuottavat tehokkaasti viruspartikkeleita, koska ne kykenevät monistamaan transfektoituja plasmideja ja tukemaan viruksen kokoamista ja vapautumista. Tämä tekee niistä elintärkeän työkalun geeniterapiatutkimuksessa, jossa näitä vektoreita käytetään geneettisen materiaalin siirtämiseen isäntäsoluihin. Soluilla on korkea transfektiotehokkuus, mikä on ratkaisevan tärkeää vieraan DNA:n onnistuneelle käyttöönotolle ja ilmentymiselle vektorin rakentamisen aikana. Tämä korkea tehokkuus mahdollistaa geenien toiminnan tutkimisen ja rekombinanttiproteiinien tuottamisen tehokkaasti.

293T/17-solulinjan vankat ominaisuudet tekevät siitä korvaamattoman arvokkaan sekä tieteelliseen perustutkimukseen että terapeuttisiin sovelluksiin. Sitä käytetään laajalti molekyylibiologiassa ja geenitekniikassa proteiinien ilmentämiseen, geenien toiminnan analysointiin ja uusien geeniterapioiden kehittämiseen. Solulinjan tehokkuus virusvektoreiden tuottamisessa helpottaa kokeita, joissa tarvitaan geneettisen materiaalin toimittamista, mikä tekee siitä virologian alan kulmakiven. 293T/17-solulinjalla on edelleen keskeinen rooli geenien toiminnan ymmärtämisessä ja terapeuttisten toimenpiteiden kehittämisessä.

Kudos
Alkion munuainen
Sovellukset
Tämä solulinja on optimaalinen valinta transfektioon, korkean läpimenon seulontaan, toksikologiaan ja rokotekehitykseen.
Synonyymit
  • HEK293T/17
  • HEK-293T/17
  • HEK 293T/17

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This HEK293T/17 cell line contains SV40, enhancing plasmid replication and packaging efficiency. The insert is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
HEK293T/17 (Cytionin tuotenumero 305117)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1926

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
SV40 T-antigeeni
Virukset
SV40 (ilmentää SV40 T-antigeenia)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Sikiö