Gå til innholdet
HEK293T/17
Vev
Embryonal nyre
Synonymer
HEK293T/17, HEK-293T/17, HEK 293T/17

Dokumenter

HEK293T/17

Cell line · Produktnummer 305117

The 293T/17 cell line is an immortalized variant of the HEK293 line, derived from human embryonic kidney cells and extensively utilized in research, parti...

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

293T/17-cellelinjen er en udødeliggjort variant av HEK293-cellelinjen, som stammer fra humane embryonale nyreceller og er mye brukt i forskning, særlig i studier og produksjon av retrovirale og lentivirale vektorer. Denne cellelinjen er blitt modifisert til å uttrykke SV40 large T-antigenet, noe som gjør den enda mer anvendelig i produksjonen av virusvektorer. Uttrykket av SV40 large T-antigenet er en nøkkelegenskap som gjør at disse cellene kan replikere plasmider som inneholder SV40-replikasjonsopprinnelsen, noe som øker utbyttet av plasmid-DNA i transiente transfeksjonsprosedyrer betydelig. Denne egenskapen er spesielt gunstig for produksjon av virusvektorer.

293T/17-celler er essensielle i produksjonen av virusvektorer som retrovirus og lentivirus. De produserer effektivt viruspartikler på grunn av sin evne til å amplifisere transfekterte plasmider og støtte viral montering og frigjøring. Dette gjør dem til et viktig verktøy i genterapiforskning, der disse vektorene brukes til å levere genetisk materiale til vertsceller. Cellene har høy transfeksjonseffektivitet, noe som er avgjørende for vellykket innføring og uttrykk av fremmed DNA under vektorkonstruksjon. Denne høye effektiviteten gjør det mulig å studere genfunksjon og generere rekombinante proteiner på en effektiv måte.

De robuste egenskapene til 293T/17-cellelinjen gjør den uvurderlig for både grunnforskning og terapeutiske anvendelser. Den brukes mye innen molekylærbiologi og genteknologi til proteinuttrykk, genfunksjonsanalyse og utvikling av nye genterapier. Cellelinjens effektivitet når det gjelder å produsere virale vektorer gjør det enklere å utføre eksperimenter som krever overføring av genetisk materiale, noe som gjør den til en hjørnestein innen virologi. 293T/17-cellelinjen fortsetter å spille en sentral rolle i arbeidet med å øke vår forståelse av geners funksjon og utvikle terapeutiske intervensjoner.

Vev
Embryonal nyre
Søknader
Denne cellelinjen er et optimalt valg for transfeksjon, screening med høy gjennomstrømning, toksikologi og vaksineutvikling.
Synonymer
  • HEK293T/17
  • HEK-293T/17
  • HEK 293T/17

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HEK293T/17 cell line contains SV40, enhancing plasmid replication and packaging efficiency. The insert is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HEK293T/17 (Cytion katalognummer 305117)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1926

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
SV40 T-antigen
Virus
SV40 (uttrykker SV40 T-antigen)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Foster