Gå til innholdet
HEK293-F-celler
Vev
Nyre
Synonymer
HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F

Dokumenter

HEK293-F-celler

Cell line · Produktnummer 300260

HEK293-F-celler er en hurtigvoksende, svært transfekterbar sublinje avledet fra den humane embryonale nyrecellelinjen 293 (HEK293). Betegnelsen «F» indikerer...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HEK293-F-celler er en hurtigvoksende, svært transfekterbar sublinje avledet fra den humane embryonale nyren 293-cellelinjen (HEK293). F-betegnelsen indikerer at disse cellene er tilpasset vekst i suspensjonskulturer, noe som gjør dem spesielt nyttige for proteinproduksjon i stor skala. Cellene vokser i en rekke serumfrie medier, noe som muliggjør skalerbare prosesser innen bioteknologiske og farmasøytiske anvendelser. HEK293-F-cellene beholder den epitelliknende morfologien til den opprinnelige HEK293-linjen, og de holdes i suspensjon uten behov for feste til et fast substrat.

Disse cellene er svært effektive når det gjelder å uttrykke rekombinante proteiner, og de er mye brukt i produksjonen av virale vektorer for genterapi, inkludert adenovirale, lentivirale og retrovirale vektorer. Den robuste veksten i suspensjon og den enkle transfeksjonen gjør dem ideelle for bruk i transiente transfeksjonsprotokoller, der de kan produsere store mengder protein i løpet av få dager etter transfeksjon. Denne egenskapen er avgjørende for raske produksjonssykluser i forskning og industri. HEK293-F-cellenes tilpasningsevne til ulike vekstforhold og deres evne til å dyrkes med høy tetthet gjør dem enda mer anvendelige i bioprosessmiljøer.

Vev
Nyre
Søknader
Vert for transfeksjon
Synonymer
  • HEK-293-F
  • HEK 293-F
  • HEK-293F
  • HEK293F
  • 293-F
  • 293 F
  • 293F

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Oppheng
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HEK293-F cell line contains SV40, enabling high transfection efficiency and robust growth in suspension culture. The modification is stably present in embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
I nakne mus
Fordoblingstid
30 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HEK293-F (Cytion katalognummer 300260)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6642

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
Vitronektin
Proteinekspresjon
CEA-negativ, p53-positiv
Virus
Transformert med adenovirus 5 DNA adenovirus 5 DNA

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
CD293 (Thermo)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2 vil gi et sammenvokst lag på omtrent 4 dager.
Væskefornyelse
2 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Foster