Preskoči na vsebino
Celice HEK293-F
Tkivo
Ledvice
Sinonimi
HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F

Dokumenti

Celice HEK293-F

Cell line · Številka izdelka 300260

Celice HEK293-F so hitro rastoča, zelo dobro transfekcijska podlinija, ki izhaja iz celične linije človeških embrionalnih ledvic 293 (HEK293). Oznaka »F« pomeni...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice HEK293-F so hitro rastoča podlinija z visoko stopnjo transfekcije, ki izhaja iz celične linije človeških embrionalnih ledvic 293 (HEK293). Oznaka "F" pomeni, da so te celice prilagojene za rast v suspenzijskih kulturah, zaradi česar so še posebej uporabne za obsežno proizvodnjo beljakovin. Celice rastejo v različnih medijih brez seruma, kar olajša razširljive postopke v biotehnoloških in farmacevtskih aplikacijah. Celice HEK293-F ohranijo epitelijsko morfologijo osnovne linije HEK293 in se vzdržujejo v suspenziji brez potrebe po pritrditvi na trdno podlago.

Te celice so zelo učinkovite pri izražanju rekombinantnih beljakovin in se pogosto uporabljajo pri proizvodnji virusnih vektorjev za gensko terapijo, vključno z adenovirusnimi, lentivirusnimi in retrovirusnimi vektorji. Zaradi njihove močne rasti v suspenziji in enostavne transfekcije so idealne za uporabo v protokolih prehodne transfekcije, kjer lahko v nekaj dneh po transfekciji proizvedejo velike količine beljakovin. Ta lastnost je ključnega pomena za hitre proizvodne cikle v raziskovalnih in industrijskih okoljih. Prilagodljivost celic HEK293-F različnim pogojem rasti in njihova sposobnost gojenja z veliko gostoto povečujeta njihovo uporabnost v okoljih bioprocesinga.

Tkivo
Ledvice
Uporaba
Gostitelj za transfekcijo
Sinonimi
  • HEK-293-F
  • HEK 293-F
  • HEK-293F
  • HEK293F
  • 293-F
  • 293 F
  • 293F

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This HEK293-F cell line contains SV40, enabling high transfection efficiency and robust growth in suspension culture. The modification is stably present in embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Na golih miših
Čas podvojitve
30 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HEK293-F (kataloška številka Cytion 300260)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6642

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Vitronektin
Ekspresija beljakovin
CEA negativen, p53 pozitiven
Virusi
Transformacija z adenovirusom 5 DNK adenovirus 5 DNK

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
CD293 (Thermo)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2 bo v približno 4 dneh oblikovalo konfluentno plast.
Obnova tekočine
2-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Plod