
- Audums
- Nieres
- Sinonīmi
- HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F
Dokumenti
HEK293-F šūnas
Cell line · Preces numurs 300260
HEK293-F šūnas ir strauji augoša, viegli transfekcijām piemērota apakšlīnija, kas iegūta no cilvēka embrionālo nieru 293 (HEK293) šūnu līnijas. Apzīmējums „F“ norāda...
Pielāgošana / Ieteikumi
- HEK293-F šūnasCell line€430.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
HEK293-F šūnas ir ātri augoša, ļoti labi transfekējama apakšlīnija, kas atvasināta no cilvēka embrionālo nieru 293 (HEK293) šūnu līnijas. Apzīmējums "F" norāda, ka šīs šūnas ir pielāgotas augšanai suspensijas kultūrās, padarot tās īpaši noderīgas liela mēroga proteīnu ražošanai. Šūnas aug dažādās barotnēs bez seruma, kas atvieglo mērogojamus procesus biotehnoloģijās un farmācijā. HEK293-F šūnas saglabā epitēlijveidīgo morfoloģiju, kas raksturīga HEK293 pamatlīnijai, un tās tiek uzturētas suspensijā bez nepieciešamības piestiprināt pie cietā substrāta.
Šīs šūnas ļoti efektīvi ekspresē rekombinantus proteīnus, un tās plaši izmanto gēnu terapijas vīrusu vektoru, tostarp adenovīrusu, lentivīrusu un retrovīrusu vektoru, ražošanā. Pateicoties to stabilai augšanai suspensijā un vieglai transfekcijai, tās ir ideāli piemērotas izmantošanai pārejas transfekcijas protokolos, kur dažu dienu laikā pēc transfekcijas var iegūt lielu olbaltumvielu daudzumu. Šī īpašība ir ļoti svarīga ātrai ražošanai pētniecībā un rūpniecībā. HEK293-F šūnu spēja pielāgoties dažādiem augšanas apstākļiem un to spēja audzēt augsta blīvuma kultūras palielina to izmantojamību bioprocesoru vidē.
- Audums
- Nieres
- Pieteikumi
- Transfekcijas saimnieks
- Sinonīmi
- HEK-293-F
- HEK 293-F
- HEK-293F
- HEK293F
- 293-F
- 293 F
- 293F
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atsperes
- ĢMO statuss
- GMO-S1
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- GMO-S1: This HEK293-F cell line contains SV40, enabling high transfection efficiency and robust growth in suspension culture. The modification is stably present in embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlijveidīgs
- Tumorogēns
- Plikām pelēm
- Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
- 30 stundas
04Identifikatori
- Atsauce
- HEK293-F (Cytion kataloga numurs 300260)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6642
05Pazīmes un uzņēmība
- Ekspresētie receptori
- Vitronektīns
- Proteīnu ekspresija
- CEA negatīvs, p53 pozitīvs
- Vīrusi
- Transformēta ar adenovīrusa 5 DNS adenovīrusa 5 DNS
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- CD293 (Thermo)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sēšanas blīvums
- 1 x 104 šūnas/cm2 veidos konfluentu slāni apmēram 4 dienu laikā.
- Šķidruma atjaunošana
- 2 reizes nedēļā
- Atgūšanās pēc atkusņa
- Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- Auglis
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā





.jpg)
