Перейти до вмісту
Клітини HEK293-F
Тканина
Нирка
Синоніми
HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F

Документи

Клітини HEK293-F

Cell line · Номер товару 300260

Клітини HEK293-F — це швидкоростуча сублінія з високою трансфекційною здатністю, отримана з клітинної лінії людської ембріональної нирки 293 (HEK293). Позначення «F» означає...

€430.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітини HEK293-F - це швидкозростаюча, високотрансфектабельна сублінія, отримана з клітинної лінії 293 ембріональної нирки людини (HEK293). Позначення "F" вказує на те, що ці клітини були адаптовані для росту в суспензійних культурах, що робить їх особливо корисними для великомасштабного виробництва білка. Клітини ростуть у різноманітних безсироваткових середовищах, що полегшує масштабування процесів у біотехнології та фармацевтиці. Клітини HEK293-F зберігають епітеліоподібну морфологію батьківської лінії HEK293 і підтримуються в суспензії без необхідності прикріплення до твердого субстрату.

Ці клітини високоефективно експресують рекомбінантні білки і широко використовуються у виробництві вірусних векторів для генної терапії, включаючи аденовірусні, лентивірусні та ретровірусні вектори. Їх активний ріст у суспензії і простота трансфекції роблять їх ідеальними для використання в протоколах транзиторної трансфекції, де вони можуть виробляти високі виходи білка протягом декількох днів після трансфекції. Ця характеристика має вирішальне значення для швидких виробничих циклів у дослідницьких і промислових умовах. Пристосованість клітин HEK293-F до різних умов росту та здатність до високощільного культивування підвищують їхню корисність у біопроцесорних середовищах.

Тканина
Нирка
Застосування
Хазяїн для трансфекції
Синоніми
  • HEK-293-F
  • HEK 293-F
  • HEK-293F
  • HEK293F
  • 293-F
  • 293 F
  • 293F

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Підвіска
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This HEK293-F cell line contains SV40, enabling high transfection efficiency and robust growth in suspension culture. The modification is stably present in embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Пухлиноутворювальний
У голих мишей
Час подвоєння
30 годин

04Ідентифікатори

Посилання
HEK293-F (номер за каталогом Cytion 300260)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_6642

05Експресія та сприйнятливість

Рецептори, що експресуються
Вітронектин
Експресія білків
CEA негативний, p53 позитивний
Віруси
Трансформовані аденовірусом 5 ДНК аденовірусом 5 ДНК

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
CD293 (Thermo)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
1 x 104 клітин/см2 дасть злитий шар приблизно за 4 дні
Оновлення рідини
2 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
Плід