Перейти до вмісту
HEK293 suspension-adapted
Тканина
Нирка

Документи

HEK293 suspension-adapted

Cell line · Номер товару 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
1

01Загальна інформація

Опис

Адаптована до суспензії клітинна лінія HEK293 - це варіант клітин людської ембріональної нирки 293 (HEK293), модифікований для росту в суспензійній культурі, а не в адгезивній культурі. Ця адаптація має важливе значення для промислового застосування, де потрібне великомасштабне виробництво білка. Клітини зберігають багато характеристик оригінальної лінії HEK293, включаючи високу ефективність трансфекції та здатність до посттрансляційної модифікації експресованих білків, подібно до нативних клітин людини.

Ці клітини особливо цінуються в біотехнологічній та фармацевтичній промисловості для виробництва рекомбінантних білків і вірусів для генної терапії та розробки вакцин. Адаптація до суспензійної культури дозволяє легше масштабувати і спрощує процес збору, роблячи його більш придатним для біообробки в комерційних масштабах. Адаптована до суспензій клітинна лінія HEK293 підтримує різні системи виробництва вірусів, включаючи аденовірус, лентивірус та адено-асоційований вірус (AAV), які є ключовими для терапевтичних застосувань та досліджень.

Загалом, адаптована до суспензій клітинна лінія HEK293 є важливим інструментом у галузі молекулярної біології та біопроцесингу, забезпечуючи універсальну платформу для виробництва різноманітних біологічно активних молекул. Простота генетичних маніпуляцій і здатність продукувати білки, які правильно складаються і посттрансляційно модифікуються відповідно до клітинних патернів людини, роблять її незамінним ресурсом у багатьох передових терапевтичних і дослідницьких умовах.

Тканина
Нирка
Застосування
Хазяїн для трансфекції

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Підвіска
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Круглий
Пухлиноутворювальний
У голих мишей

04Ідентифікатори

Посилання
HEK293, адаптований для підвішування (номер за каталогом Cytion 300686)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0045

05Експресія та сприйнятливість

Рецептори, що експресуються
Вітронектин
Експресія білків
CEA негативний, p53 позитивний
Вразливість до вірусів
Трансформовані аденовірусом 5 ДНК аденовірусом 5 ДНК

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
Panserin 293S (PanBiotech, Німеччина)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Добавки не потрібні
Реагент для дисоціації
Не обов'язково
Пересадка в нове середовище
Підтримуйте клітини в суспензії при щільності від 5 x 105 до 2-3 x 106 клітин/мл у колбах для культивування клітин Eppendorf на шейкері в інкубаторі при температурі 37 °C/5 % CO2. Проведіть субкультуру, коли щільність клітин досягне 2-3 x 106 клітин/мл. Обережно відокремте клітини, щоб уникнути утворення скупчень. Після досягнення щільності клітин 1-2 x 106 клітин/мл, збирайте клітини шляхом центрифугування при 200xg протягом 5 хвилин і викидайте супернатант. Розведіть у відповідному об'ємі свіжого, попередньо підігрітого культурального середовища і підрахуйте клітини, щоб отримати інформацію про життєздатність і кількість клітин. Зберіть клітини шляхом центрифугування при 200xg протягом 5 хвилин і викиньте супернатант. Ресуспендуйте клітини у відповідному об'ємі заморожувального середовища і підрахуйте ще раз. Життєздатність клітин повинна бути >>80%, рекомендується щільність клітин 5-10 мільйонів клітин/мл. Перенесіть клітини піпеткою в попередньо марковані кріопробірки. Використовуйте контейнер для заморожування CoolCell або морозильник з контрольованою швидкістю охолодження, щоб забезпечити швидкість охолодження 1°C/хв.
Щільність висіву
5 x 105 клітин/мл
Відновлення після відлиги
Започніть культивування при щільності 5 x 105 клітин/мл і підтримуйте концентрацію клітин на рівні 2-3 x 106 клітин/мл для оптимального росту. Інкубуйте при 37 °C/5 % CO2 на клітинному шейкері при 100-150 об/хв.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
В якості середовища для кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після розморожування.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
Плід