Preskoči na vsebino
HEK293 suspension-adapted
Tkivo
Ledvice

Dokumenti

HEK293 suspension-adapted

Cell line · Številka izdelka 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Suspenzijsko prilagojena celična linija HEK293 je različica celic človeške embrionalne ledvice 293 (HEK293), ki je bila spremenjena tako, da raste v suspenzijski kulturi namesto v adherentni kulturi. Ta prilagoditev je pomembna za industrijske aplikacije, kjer je potrebna obsežna proizvodnja beljakovin. Celice ohranjajo številne značilnosti prvotne linije HEK293, vključno z visoko učinkovitostjo prehodne transfekcije in sposobnostjo posttranslacijskega spreminjanja izraženih beljakovin na podoben način kot pri izvornih človeških celicah.

Te celice so še posebej cenjene v biotehnološki in farmacevtski industriji za proizvodnjo rekombinantnih beljakovin in virusov za gensko terapijo in razvoj cepiv. Prilagoditev suspenzijski kulturi omogoča lažjo razširljivost in poenostavlja postopek pridobivanja, zaradi česar je primernejša za bioprocese v komercialnem obsegu. Celična linija HEK293, prilagojena suspenziji, podpira različne sisteme za proizvodnjo virusov, vključno z adenovirusom, lentivirusom in adeno-asociiranim virusom (AAV), ki so ključnega pomena za terapevtske aplikacije in raziskave.

Na splošno je celična linija HEK293, prilagojena na suspenzijo, ključno orodje na področju molekularne biologije in bioprocesinga, saj zagotavlja vsestransko platformo za proizvodnjo različnih biološko aktivnih molekul. Zaradi enostavne genetske manipulacije in sposobnosti proizvajanja proteinov, ki so pravilno zloženi in posttranslacijsko spremenjeni v skladu z vzorci človeških celic, je nepogrešljiv vir v številnih naprednih terapevtskih in raziskovalnih okoljih.

Tkivo
Ledvice
Uporaba
Gostitelj za transfekcijo

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Okrogla stran
Tumorigeničen
Na golih miših

04Identifikatorji

Navajanje vira
HEK293, prilagojen na suspenzijo (kataloška številka Cytion 300686)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Vitronektin
Ekspresija beljakovin
CEA negativen, p53 pozitiven
Občutljivost na virus
Transformacija z adenovirusom 5 DNK adenovirus 5 DNK

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
Panserin 293S (PanBiotech, Nemčija)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Dodatki niso potrebni
Reagenca za disociacijo
Ni potrebno
Preusmeritev v drugo kulturo
Vzdržujte suspenzijske celice pri gostoti med 5 x 105 in 2-3 x 106 celic/ml v Eppendorfovih kolbah za celično kulturo na stresalniku v inkubatorju pri 37 °C/5 % CO2. Ko gostota celic doseže 2-3 x 106 celic/ml, opravite subkulturo. Celice previdno odstranite, da se ne tvorijo skupki. Ko je gostota celic 1-2 x 106 celic/ml, celice zberite s centrifugiranjem pri 200xg 5 minut in zavrzite supernatant. Razredčite v ustrezni količini svežega, predhodno ogretega kultivnega medija in preštejte celice, da dobite informacije o vitalnosti in številu celic. Zberite celice s centrifugiranjem pri 200xg za 5 minut in zavrzite supernatant. Ponovno suspendirajte celice v ustrezni količini zamrzovalnega medija in jih ponovno preštejte. Življenskost celic mora biti >>80 %, priporočena gostota celic je 5–10 milijonov celic/ml. Celice s pipeto prenesite v vnaprej označene krioviale. Uporabite zamrzovalni kontejner CoolCell ali zamrzovalnik z nadzorovano hitrostjo, da zagotovite hitrost hlajenja 1 °C/min.
Gostota setve
5 x 105 celic/ml
Obnova po odtaljevanju
Za optimalno rast začnite kultiviranje pri gostoti 5 x 105 celic/ml in ohranite koncentracijo celic do 2-3 x 106 celic/ml. Inkubirajte pri 37 °C/5 % CO2 na stresalniku celic pri 100-150 vrtljajih na minuto.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Plod