Prejsť na obsah
HEK293 suspension-adapted
Tkanivo
Obličky

Dokumenty

HEK293 suspension-adapted

Cell line · Číslo výrobku 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia HEK293 adaptovaná na suspenziu je variantom buniek ľudských embryonálnych obličiek 293 (HEK293), ktoré boli upravené tak, aby rástli v suspenznej kultúre namiesto adherentnej kultúry. Táto úprava je dôležitá pre priemyselné aplikácie, kde sa vyžaduje veľkoplošná produkcia proteínov. Bunky si zachovávajú mnohé vlastnosti pôvodnej línie HEK293 vrátane robustnej účinnosti prechodnej transfekcie a schopnosti posttranslačne modifikovať exprimované proteíny spôsobom podobným ako v pôvodných ľudských bunkách.

Tieto bunky sú obzvlášť cenené v biotechnologickom a farmaceutickom priemysle na výrobu rekombinantných proteínov a vírusov na génovú terapiu a vývoj vakcín. Prispôsobenie suspenznej kultúre umožňuje ľahšiu škálovateľnosť a zjednodušuje proces zberu, čím sa stáva vhodnejším pre komerčné bioprocesy. Bunková línia HEK293 adaptovaná na suspenznú kultúru podporuje rôzne systémy produkcie vírusov vrátane adenovírusu, lentivírusu a adenoasociovaného vírusu (AAV), ktoré sú kľúčové pre terapeutické aplikácie a výskum.

Celkovo je suspenzne adaptovaná bunková línia HEK293 kľúčovým nástrojom v oblasti molekulárnej biológie a bioprocesingu, ktorý poskytuje univerzálnu platformu na produkciu rôznych biologicky aktívnych molekúl. Jej jednoduchá genetická manipulácia a schopnosť produkovať proteíny, ktoré sú správne zložené a posttranslačne modifikované podľa vzorov ľudských buniek, z nej robia nenahraditeľný zdroj v mnohých pokročilých terapeutických a výskumných podmienkach.

Tkanivo
Obličky
Aplikácie
Transfekčný hostiteľ

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Okrúhle
Tumorigenický
Na nahých myšiach

04Identifikátory

Citácia
HEK293 adaptovaná suspenzia (katalógové číslo Cytion 300686)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
Vitronektín
Expresia proteínov
CEA negatívny, p53 pozitívny
Náchylnosť na vírusy
Transformované adenovírusom 5 DNA adenovírusom 5 DNA

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Panserin 293S (PanBiotech, Nemecko)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Nie sú potrebné žiadne doplnky
Disociačné činidlo
Nevyžaduje sa
Rozmnožovanie kultúr
Udržujte suspenzné bunky pri hustote buniek medzi 5 x 105 a 2-3 x 106 buniek/ml v Eppendorfových fľašiach na kultiváciu buniek na trepačke v inkubátore pri teplote 37 °C/5 % CO2. Akonáhle hustota buniek dosiahne 2-3 x 106 buniek/ml, vykonajte subkultiváciu. Opatrne uvoľnite bunky, aby sa nevytvorili zhluky. Akonáhle dosiahnete hustotu buniek 1-2 x 106 buniek/ml, zberajte bunky centrifugáciou pri 200xg počas 5 minút a zlikvidujte supernatant. Zrieďte v primeranom objeme čerstvého, predhriateho kultivačného média a spočítajte bunky, aby ste získali informácie o životaschopnosti a počte buniek. Zbierz komórki przez odwirowanie przy 200xg przez 5 minut i wylej supernatant. Ponownie zawieś komórki w odpowiedniej objętości medium zamrażającego i ponownie je policz. Životaschopnosť buniek by mala byť >>80 %, odporúča sa hustota buniek 5 – 10 miliónov buniek/ml. Pipetujte bunky do vopred označených kryovialiek. Použite buď mraziaci kontajner CoolCell, alebo mrazničku s kontrolovanou rýchlosťou, aby ste zabezpečili rýchlosť chladenia 1 °C/min.
Hustota výsevu
5 x 105 buniek/ml
Zotavenie po rozmrazení
Kultúry iniciujte pri hustote 5 x 105 buniek/ml a pre optimálny rast udržujte koncentráciu buniek na úrovni 2-3 x 106 buniek/ml. Inkubujte pri 37 °C/5 % CO2 na trepačke buniek pri 100-150 ot/min.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
Plod