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HEK293 suspension-adapted
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HEK293 suspension-adapted

Cell line · Product number 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

US$550.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

A linhagem celular HEK293 adaptada à cultura em suspensão é uma variante das células renais embrionárias humanas 293 (HEK293) que foi modificada para crescer em cultura em suspensão, em vez de cultura aderente. Essa adaptação é importante para aplicações industriais nas quais é necessária a produção de proteínas em grande escala. As células mantêm muitas das características da linhagem HEK293 original, incluindo uma eficiência robusta de transfecção transitória e a capacidade de modificar pós-traducionalmente as proteínas expressas de maneira semelhante à das células humanas nativas.

Essas células são particularmente valorizadas nas indústrias biotecnológica e farmacêutica para a produção de proteínas recombinantes e vírus destinados à terapia gênica e ao desenvolvimento de vacinas. A adaptação à cultura em suspensão permite maior facilidade de escalabilidade e simplifica o processo de colheita, tornando-a mais adequada para bioprocessamento em escala comercial. A linhagem celular HEK293 adaptada à suspensão é compatível com vários sistemas de produção viral, incluindo adenovírus, lentivírus e vírus adeno-associado (AAV), que são fundamentais em aplicações terapêuticas e na pesquisa.

De modo geral, a linhagem celular HEK293 adaptada à cultura em suspensão é uma ferramenta crucial nos campos da biologia molecular e do bioprocessamento, oferecendo uma plataforma versátil para a produção de diversas moléculas biologicamente ativas. Sua facilidade de manipulação genética e capacidade de produzir proteínas corretamente dobradas e modificadas pós-traducionalmente de acordo com os padrões das células humanas a tornam um recurso indispensável em muitos contextos avançados de terapia e pesquisa.

Tissue
Rim
Applications
Hospedeiro de transfecção

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Redondo
Tumourigenic
Em camundongos nude

04Identifiers

Citation
Células HEK293 adaptadas para suspensão (número de catálogo da Cytion 300686)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Vitronectina
Protein expression
CEA negativo, p53 positivo
Virus susceptibility
Transformado com DNA do adenovírus 5 DNA do adenovírus 5

06Handling and culture

Culture medium
Panserin 293S (PanBiotech, Alemanha)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Não é necessário tomar suplementos
Dissociation reagent
Não é necessário
Subculturing
Mantenha as células em suspensão em densidades celulares entre 5 x 10⁵ e 2-3 x 10⁶ células/ml em frascos de cultura celular Eppendorf, em um agitador dentro de uma incubadora a 37 °C/5% de CO₂. Faça a subcultura assim que a densidade celular atingir 2–3 × 10⁶ células/ml. Desprenda cuidadosamente as células para evitar a formação de aglomerados. Assim que a densidade celular de 1–2 × 10⁶ células/ml for alcançada, recolha as células por centrifugação a 200xg por 5 min e descarte o sobrenadante. Dilua em um volume apropriado de meio de cultura fresco e pré-aquecido e conte as células para obter informações sobre a viabilidade e o número de células. Recolha as células por centrifugação a 200xg por 5 minutos e descarte o sobrenadante. Resuspenda as células em um volume adequado de meio de congelamento e conte-as mais uma vez. A viabilidade celular deve ser >>80%; recomenda-se uma densidade celular de 5 a 10 milhões de células/ml. Pipete as células em criotubos pré-rotulados. Utilize o recipiente de congelamento CoolCell ou um congelador de taxa controlada para garantir uma taxa de resfriamento de 1 °C/min.
Seeding density
5 × 105 células/ml
Post-thaw recovery
Inicie as culturas com uma densidade de 5 x 10⁵ células/ml e mantenha a concentração celular entre 2 e 3 x 10⁶ células/ml para um crescimento ideal. Incube a 37 °C/5% de CO₂ em um agitador celular a 100-150 rpm.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
Feto