Gå til innholdet
HEK293 suspension-adapted
Vev
Nyre

Dokumenter

HEK293 suspension-adapted

Cell line · Produktnummer 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Den suspensjonstilpassede cellelinjen HEK293 er en variant av de humane embryonale nyrecellene 293 (HEK293) som er modifisert til å vokse i suspensjonskultur i stedet for i adherent kultur. Denne tilpasningen er viktig for industrielle anvendelser der det er behov for proteinproduksjon i stor skala. Cellene har beholdt mange av egenskapene til den opprinnelige HEK293-linjen, blant annet en robust transient transfeksjonseffektivitet og evnen til å posttranslasjonelt modifisere uttrykte proteiner på en måte som ligner den man finner i opprinnelige humane celler.

Disse cellene er spesielt verdsatt i bioteknologi- og farmasøytisk industri for produksjon av rekombinante proteiner og virus til genterapi og vaksineutvikling. Tilpasningen til suspensjonskultur gjør det lettere å skalere og forenkler høstingsprosessen, noe som gjør den mer egnet for bioprosessering i kommersiell skala. Den suspensjonstilpassede cellelinjen HEK293 støtter ulike virale produksjonssystemer, inkludert adenovirus, lentivirus og adenoassosiert virus (AAV), som er sentrale i terapeutiske anvendelser og forskning.

HEK293-suspensjonscellelinjen er et viktig verktøy innen molekylærbiologi og bioprosessering, og den utgjør en allsidig plattform for produksjon av ulike biologisk aktive molekyler. Den enkle genetiske manipuleringen og evnen til å produsere proteiner som er korrekt foldet og posttranslasjonelt modifisert i henhold til humane cellemønstre, gjør den til en uunnværlig ressurs i mange avanserte behandlings- og forskningsmiljøer.

Vev
Nyre
Søknader
Vert for transfeksjon

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Oppheng
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Rund
Tumorinduserende
I nakne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HEK293 suspensjonstilpasset (Cytion katalognummer 300686)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
Vitronektin
Proteinekspresjon
CEA-negativ, p53-positiv
Virusfølsomhet
Transformert med adenovirus 5 DNA adenovirus 5 DNA

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
Panserin 293S (PanBiotech, Tyskland)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Ingen kosttilskudd nødvendig
Dissosiasjonsmiddel
Ikke nødvendig
Subkultivering
Oppretthold suspensjonscellene ved en celletetthet mellom 5 x 105 og 2-3 x 106 celler/ml i Eppendorf-cellekulturflasker på en rister i en inkubator ved 37 °C/5 % CO2. Subkultur når celletettheten har nådd 2-3 x 106 celler/ml. Fjern cellene forsiktig for å unngå klumper. Når celletettheten på 1-2 x 106 celler/ml er oppnådd, samle cellene ved å sentrifugere ved 200xg i 5 minutter og kast supernatanten. Fortynn i et passende volum ferskt, forvarmet dyrkningsmedium og tell cellene for å få informasjon om levedyktigheten og antall celler. Samle cellene ved å sentrifugere ved 200 x g i 5 minutter og kast supernatanten. Resuspender cellene i et passende volum frysemedium og tell dem igjen. Cellelevbarheten bør være >>80 %, og en celletetthet på 5–10 millioner celler/ml anbefales. Pipetter cellene inn i forhåndsmerkede kryorør. Bruk enten CoolCell-frysebeholder eller en fryser med kontrollert hastighet for å sikre en avkjølingshastighet på 1 °C/min.
Såtetthet
5 x 105 celler/ml
Gjenoppretting etter tining
Start kulturer med en tetthet på 5 x 105 celler/ml og hold cellekonsentrasjonen oppe på 2-3 x 106 celler/ml for optimal vekst. Inkuber ved 37 °C/5 % CO2 på en celle-shaker ved 100-150 rpm.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Foster