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HEK293 suspension-adapted
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Rim

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HEK293 suspension-adapted

Cell line · Número do produto 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular HEK293 adaptada à suspensão é uma variante das células 293 do rim embrionário humano (HEK293) que foi modificada para crescer em cultura em suspensão em vez de cultura aderente. Esta adaptação é importante para aplicações industriais em que é necessária a produção de proteínas em grande escala. As células mantêm muitas das caraterísticas da linha original HEK293, incluindo uma robusta eficiência de transfecção transiente e a capacidade de modificar pós-traducionalmente as proteínas expressas de uma forma semelhante à das células humanas nativas.

Estas células são particularmente valorizadas nas indústrias biotecnológica e farmacêutica para a produção de proteínas recombinantes e vírus para terapia genética e desenvolvimento de vacinas. A adaptação à cultura em suspensão permite uma escalabilidade mais fácil e simplifica o processo de colheita, tornando-a mais adequada para o bioprocessamento à escala comercial. A linha celular HEK293 adaptada à suspensão suporta vários sistemas de produção de vírus, incluindo adenovírus, lentivírus e vírus adeno-associados (AAV), que são fundamentais em aplicações terapêuticas e na investigação.

Globalmente, a linha celular HEK293 adaptada à suspensão é uma ferramenta crucial nos domínios da biologia molecular e do bioprocessamento, proporcionando uma plataforma versátil para a produção de várias moléculas biologicamente activas. A sua facilidade de manipulação genética e a sua capacidade de produzir proteínas corretamente dobradas e pós-traducionalmente modificadas de acordo com os padrões das células humanas fazem dela um recurso indispensável em muitos contextos terapêuticos e de investigação avançados.

Tecido
Rim
Aplicações
Hospedeiro de transfecção

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Redondo
Tumorigénico
Em ratinhos nus

04Identificadores

Referência
HEK293 adaptado para suspensão (número de catálogo Cytion 300686)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0045

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Vitronectina
Expressão proteica
CEA negativo, p53 positivo
Susceptibilidade ao vírus
Transformado com ADN do adenovírus 5 ADN do adenovírus 5

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
Panserin 293S (PanBiotech, Alemanha)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Não são necessários suplementos
Reagente de dissociação
Não é necessário
Subcultura
Mantenha as células em suspensão a densidades celulares entre 5 x 105 e 2-3 x 106 células/ml em frascos de cultura celular Eppendorf num agitador dentro de uma incubadora a 37 °C/5% de CO2. Faça uma subcultura quando a densidade celular atingir 2-3 x 106 células/ml. Desprenda cuidadosamente as células para evitar a formação de aglomerados. Quando a densidade celular de 1-2 x 106 células/ml for alcançada, recolha as células por centrifugação a 200xg durante 5 minutos e descarte o sobrenadante. Dilua num volume adequado de meio de cultura fresco e pré-aquecido e conte as células para obter informações sobre a viabilidade e o número de células. Recolha as células por centrifugação a 200xg durante 5 minutos e descarte o sobrenadante. Resuspender as células no volume adequado de meio de congelação e contar novamente. A viabilidade celular deve ser >>80%, sendo recomendada uma densidade celular de 5 a 10 milhões de células/ml. Pipete as células para criotubos pré-rotulados. Use um recipiente de congelamento CoolCell ou um congelador de taxa controlada para garantir uma taxa de resfriamento de 1 °C/min.
Densidade de sementeira
5 x 105 células/ml
Recuperação após o descongelamento
Inicie as culturas com uma densidade de 5 x 105 células/ml e mantenha a concentração celular entre 2 e 3 x 106 células/ml para um crescimento ideal. Incube a 37 °C/5% de CO2 num agitador celular a 100-150 rpm.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
Feto