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HEK293 suspension-adapted
ティッシュ
腎臓

HEK293 suspension-adapted

Cell line · 製品番号 300686

The HEK293 suspension-adapted cell line is a variant of the human embryonic kidney 293 (HEK293) cells that has been modified to grow in suspension culture...

€500.00税・送料別

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01概要

説明

HEK293懸濁適応細胞株は、ヒト胚性腎臓293(HEK293)細胞の変種で、接着培養ではなく懸濁培養で増殖するように改変されている。この適応は、タンパク質の大量生産が必要とされる工業的応用にとって重要である。この細胞は、強固な一過性トランスフェクション効率や、発現されたタンパク質をネイティブのヒト細胞と同様の方法で翻訳後修飾する能力など、オリジナルのHEK293株の特徴の多くを維持している。

これらの細胞は、遺伝子治療やワクチン開発のための組換えタンパク質やウイルスの生産において、バイオテクノロジーや製薬産業で特に評価されている。懸濁培養への適応は、より容易なスケーラビリティを可能にし、採取プロセスを簡素化するので、商業規模のバイオプロセスにより適している。HEK293懸濁適応細胞株は、アデノウイルス、レンチウイルス、アデノ随伴ウイルス(AAV)を含む様々なウイルス生産系をサポートしており、これらは治療応用や研究において極めて重要である。

全体として、HEK293懸濁適応細胞株は、分子生物学およびバイオプロセスの分野において重要なツールであり、様々な生物学的に活性な分子の生産に汎用性の高いプラットフォームを提供する。遺伝子操作が容易で、ヒト細胞のパターンに従って正しく折り畳まれ、翻訳後修飾されたタンパク質を生産できることから、多くの高度な治療や研究の場において欠くことのできない資源となっている。

ティッシュ
腎臓
用途
トランスフェクション宿主

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
サスペンション
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This suspension-adapted HEK293 cell line contains adenovirus 5-derived E1 sequences from the parental HEK293 line, supporting high proliferative and protein expression capacity. The modification is stably present in transformed embryonic kidney cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
ラウンド
腫瘍形成性
ヌードマウス

04識別子

引用
HEK293懸濁液(Cytionカタログ番号300686)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0045

05発現と感受性

発現している受容体
ビトロネクチン
タンパク質の発現
CEA陰性、p53陽性
ウイルス感受性
アデノウイルス5 DNAで形質転換 アデノウイルス5 DNAで形質転換

06取り扱いと飼育

培地
パンセリン293S(パンバイオテック社、ドイツ)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
サプリメント不要
解離試薬
不要
継代培養
懸濁細胞を、37℃/5% CO₂インキュベーター内のシェーカー上で、エッペンドルフ細胞培養フラスコにて5×10⁵~2-3×10⁶細胞/mlの細胞密度で維持する。細胞密度が2-3×10⁶細胞/mlに達したら継代する。細胞塊を避けるため、慎重に細胞を剥離する。 細胞密度が1-2×10⁶細胞/mlに達したら、200×gで5分間遠心分離し細胞を回収、上清を廃棄する。適切な量の温めた新鮮培養液で希釈し、細胞を計数して生存率と細胞数を把握する。 200×gで5分間遠心分離し細胞を回収、上清を廃棄する。適切な量の凍結保存液で細胞を再懸濁し、再度細胞数を計数する。 細胞生存率は80%以上であるべきであり、細胞密度は500万~1000万細胞/mlが推奨される。事前にラベルを貼った凍結用バイアルに細胞をピペッティングする。冷却速度1°C/分を保証するため、CoolCell凍結容器または制御冷却速度フリーザーを使用する。
播種密度
5 × 10⁵ 細胞/ml
解凍後の回復
培養は5×10⁵細胞/mlの密度で開始し、最適な増殖のため細胞濃度を2-3×10⁶細胞/mlに維持する。37℃/5% CO₂条件下で、100-150 rpmの細胞シェーカー上でインキュベートする。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、解凍後の生存率を十分に高めるため、完全増殖培地+10%DMSOを使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
胎児